影响原生质体融合的因素.pptVIP

影响原生质体融合的因素植物体细胞杂交过程中，有许多因子可以影响最后的结果，其中包括前面提到的原生质体分离和培养的所有影响因子，融合双亲缘关系远近及品种组合，融合方法和参数等。融合方法1.PEG诱导融合法?PEG诱导融合的特点：优点是融合成本低，勿需特殊设备；融合子产生的异核率较高；融合过程不受物种限制。缺点是融合过程繁琐，PEG可能对细胞有毒害。?PEG作用机理：Kao等认为，由于PEG分子具有轻微的负极性，故可以与具有正极性基团的水、蛋白质和碳水化合物等形成H键，从而在原生质体之间形成分子桥，其结果使原生质体发生粘连进而促进原生质体融合；另外，PEG能增加类脂膜的流动性，也使原生质体的核、细胞器发生融合成为可能。电融合仪的结构特点：交变电场部分高频直流电击部分电融合的基本过程：细胞膜的接触：当原生质体置于电导率很低的溶液中时，电场通电后，电流即通过原生质体而不是通过溶液，其结果是原生质体在电场作用下极化而产生偶极子，从而使原生质体紧密接触排列成串；膜的击穿：原生质体成串排列后，立即给予高频直流脉冲就可以使原生质膜击穿，从而导致两个紧密接触的细胞融合在一起并圆球化。关于融合参数：交流电压交变电场的振幅频率交变电场的处理时间直流高频电压脉冲宽度脉冲次数Thankyou*2012年10月25日细胞工程电融合PEG融合2．电融合法?Electrofusion,Electricallyinducedfusion与PEG融合相比，电融合有三大优点：不存在对细胞的毒害问题；融合效率高；融合技术操作简便。*