猪源纤维蛋白黏合剂对大鼠皮肤创伤的愈合及羟脯氨酸表达的影响.docxVIP

猪源纤维蛋白黏合剂对大鼠皮肤创伤的愈合及羟脯氨酸表达的

影响

欧思琳;陈灶妹;吴庆荣;陈柯君;吴云;赵月;李茹冰

【摘要】为促进皮肤创伤愈合提供实验依据,最终为临床新应用提供依据,探究猪源纤维蛋白黏合剂(FS)其对大鼠皮肤创伤的愈合及其对创面皮肤羟脯氨酸表达的影响.72只体重为160～200gSD雄性大鼠随机分为空白对照组、白凡士林组和FS组,于背部制作直径为1.5cm的全层圆形皮肤切除创面,每组各24只,空白对照组不做任何处理,白凡士林组和FS组则分别用医用白凡士林和FS涂抹伤口.术后3、7、14和21d测量各组大鼠的皮肤伤口面积,计算各组皮肤创面愈合率;取术后7和14d伤口皮肤标本进行HE病理组织学观察;并于术后7、14和21d取组织进行酶联免疫法测定愈合组织中羟脯氨酸蛋白含量.在术后3、7、14和21d时,FS组的伤口愈合率高于空白对照组,且其差异具有统计学意义(p0.05).HE染色结果显示在第7d时FS组胶原沉积高于空白对照组;血管新生数亦高于空白组、白凡士林组,差异均具有统计学意义(p0.05).在14d时,与空白对照组相比,FS组胶原沉积较高,且差异具有统计学意义(p0.05),而血管新生数各组之间无统计学意义(p0.05).对各组创面组织中羟脯氨酸含量进行测定,结果发现,在第7、14和21d时,FS组大鼠皮肤创伤组织中HYP含量均明显高于空白对照组(p0.05).说明猪源纤维蛋白黏合剂能有效促进大鼠皮肤创伤的愈合,缩短愈合时间,其具有潜在的应用价值,为临床皮肤创伤治愈提供了新思路.

【期刊名称】《科学技术与工程》

【年(卷),期】2018(018)032

【总页数】6页(P168-173)

【关键词】皮肤创伤;猪源纤维蛋白黏合剂;白凡士林;羟脯氨酸

【作者】欧思琳;陈灶妹;吴庆荣;陈柯君;吴云;赵月;李茹冰

【作者单位】广东药科大学药学院,广州510006;广州军区广州总医院药剂科,广州510010

【正文语种】中文

【中图分类】R751.05

皮肤是人体最大的器官，在机体中起到屏障作用，保护身体使其免于伤害，同时具有防止体内组织液丢失、感受外界刺激和调节体温等作用[1]。皮肤受创后，它的愈合牵涉一系列的细胞和分子的复杂级联重建，包括细胞迁移、增殖、细胞外基质沉积和重塑等[2,3]。皮肤修复过程在损伤后立即启动，首先是损伤的血管释放各种生长因子、细胞因子和低分子量化合物，这是一个动态的过程[4,5]。尤其是随着愈合的进展，如何促进创面闭合和减少皮肤受创后瘢痕的形成已成为当今的关注主题；同时对皮肤伤口敷料的要求亦越来越高与严格。理想的伤口敷料应具备保护伤口免受细菌感染、防止过度失水为愈合提供湿润环境的条件；并具有良好的生物相容性。为更好地满足临床上对皮肤创伤敷料的应用需求，近年来对该类产品的研究不断增加，同时也推动和促进了组织黏合剂的发展与应用[6—8]。

纤维蛋白黏合剂因具有良好的生物相容性、可降解性和止血高效等特性，已成为皮肤科、整形科等重要科室在治疗皮肤创面时的首要之选。然而目前国内上市的纤维蛋白黏合剂主要的临床应用均为止血作用而非粘合作用，因此本研究在成功研发一款新型纤维蛋白黏合剂基础上，围绕该黏合剂对皮肤创伤愈合的作用及其对羟脯氨

酸的表达水平的影响进行一系列的研究，旨在确定该黏合剂对皮肤愈合的疗效，为

该黏合剂在临床上应用于皮肤创面治疗提供实验依据。1材料与方法

实验材料

160～200gSPF级SD雄性大鼠72只(广东省医学实验动物中心)、FS(广州市众为生物技术有限公司)、白凡士林(南昌白云药业有限公司)、双联注射器(上海米沙瓦医科工业有限公司)、10%水合氯醛(广州军区广州总医院)、剃毛器(松下儿童理发器，ER353A)、Hyp试剂盒(南京建成生物工程研究所)、荧光数码成像BX—51显微镜(OLYMPUS,USA)、Tegaderm透明敷料(3M，USA)。

实验方法

猪源纤维蛋白黏合剂的制备

猪源纤维蛋白黏合剂采用特效配方及冻干工艺，主要将纤维蛋白原、凝血酶分开冻干在安培瓶中低温保存，使用前用各自的溶剂溶解后注入双联注射器中，同时注射时，两种组分在到达施用点之前于针头处混合，喷射成胶。

称取猪源血浆冷沉淀，切碎，37 ℃下搅拌溶解，过滤去除不溶性蛋白，加入 0.3%磷酸三丁酯和1%Tween-80，25℃水浴6h灭活脂包膜病毒。重复2次低温冷乙醇沉淀，以去除杂蛋白和残余S/D灭活剂，离心分离。将纤维蛋白原沉淀溶解，

加入适量保护剂，0.22μm无菌过滤后分装，进行真空冷冻干燥。冻干品再次干热灭活病毒，得到纤维蛋白原冻干