中东呼吸综合征冠状病毒MERS-CoV检测技术课件.pptVIP

继续采样，如有必要应送样至有MERS-CoV检测经验的参比实验室进行检测入选病例rRT-PCRupE基因进行筛查实验阳性阴性rRT-PCRORF1a、ORF1b或N基因区进行确证实验阴性，但如果临床和流行病学证据充分，继续采样重复检测阴性阳性RdRp或N区测序实验阴性显示为其他序列显示MERS-CoV确诊病例确诊病例中东呼吸综合征冠状病毒实验室检测《国家卫生计生委办公厅关于印发中东呼吸综合征疫情防控方案（第二版）的通知》（国卫办疾控发〔2015〕34号）《湖北省中东呼吸综合征疫情防控应急预案（第一版）》（鄂卫生计生发〔2014〕38号）《中东呼吸综合征冠状病毒实验室检测技术指南》（中疾控应急发[2013]375号）《卫生部办公厅办公厅关于做好新型冠状病毒实验活动生物安全管理工作的通知》（卫办科教发[2012]134号）WHO:Laboratory?TestingforMiddleEastRespiratorySyndrome?Coronavirus：interim?recommendations(revised)?.(Sept.?2014?）USCDC：InterimGuidelinesforCollecting,Handling,andTestingClinicalSpecimensfromPatientsUnderInvestigation(PUIs)forMiddleEastRespiratorySyndromeCoronavirus(MERS-CoV)-Version2参考依据：冠状病毒中东呼吸综合征冠状病毒中东呼吸综合征冠状病毒（MERS-CoV）β类冠状病毒的2c亚群，有包膜基因组为线性非节段单股正链的RNA病毒，全长约30kb球形，直径为120-160nm受体为二肽基肽酶4（Dipeptidylpeptidase4，DPP4,也称为CD26人类冠状病毒人类冠状病毒感染一般表现为上呼吸道感染和/或消化道症状冠状病毒引起的严重病例报道多见于婴幼儿、老人和免疫功能低下的人群冠状病毒也引起新生儿、婴幼儿、儿童和老年人的下呼吸道疾病和社区获得性肺炎，包括流感样疾病、慢性支气管炎急性发作等冠状病毒分布于全球，在温带气候地区，冠状病毒的呼吸道感染主要发生在冬季，秋冬季和春季会略有升高。采集对象中东呼吸综合征冠状病毒感染疑似病例、临床诊断病例及需要进一步研究的确诊病例；其它需要进行MERS-CoV感染诊断或鉴别诊断者。采集要求采样人员应经过生物安全培训合格并具备必需的操作技能。采集过程中的安全防护参照附件4“湖北省中东呼吸综合征医疗卫生人员防护技术指南”进行。住院病例样本由所在医院医护人员采集，当地疾控机构专业人员负责技术指导。密切接触者样本由当地疾控机构专业人员负责采集。根据实际工作需要，需要多次采样。样本种类上呼吸道样本：包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液、深咳痰液下呼吸道样本：包括呼吸道抽取物、支气管灌洗液、肺组织活检样本尸检样本：主要采集肺、气管、肾脏的组织样本。血液样本：急性期、恢复期双份血清。第一份血清尽早（最好在发病后7天内）采集，同时采集抗凝全血样本。第二份血清应在发病后第3～4周采集。采集量要求每份5ml，使用真空采血管。采集全血的抗凝管不能含肝素。根据需要动态采集的其它相应样本。采集方法咽拭子鼻拭子鼻咽或呼吸道抽取物咽漱液深咳痰液呼吸道灌洗液肺组织活检样本尸检样本血清样本全血样本样本包装所有样本应放在大小适合的带螺旋盖内有垫圈、耐冷冻的样本采集管里，拧紧。将密闭后的样本放入大小合适的塑料袋内密封，每袋装一份样本。按照感染性物质B类包装运输，容器外注明样本编号、种类、姓名及采样日期。疑似病例样本采集后在生物安全二级实验室生物安全柜内分装成三份：一份医疗机构自行检测用或送当地疾控中心检测用，一份送省级疾控中心检测，一份保存以备送国家疾控中心复核。如果发现特定的靶基因中有某一种基因的PCR结果为阳性，该病例样本不再进行分装、检测，直接交省疾控中心进行后续处理。样本保存样本应24小时内进行检测，样本临时保存于4℃，避免反复冻融。若呼吸道样品72小时以上才能到达实验室，将样品储存在-80℃并使用干冰进行运输，应避免样品反复冻融。从全血分离的血清应4℃储存并运输，或用干冰、液氮冷冻并运输。由于无霜冰柜温度波动较大，应避免使用无霜冰柜储存呼吸道和血清样品。转运条件样本采集后应尽快的送往实验室，运输过程中应持续保持低温状态。检测结果阳性样本应及时送省级疾控中心复