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- 2024-06-17 发布于河南
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标准操作规程(SOP)——流感病毒神经氨
酸酶活性试验及其活性抑制试验
一、目的
病毒神经氨酸酶(E.C.3.2.1.18酰基神经氨酸水解酶)催化裂解末端唾液酸
和邻近D-半乳糖或-半乳糖胺间α-酮苷连接。世界卫生组织国际流感参照和
协作中心,于1973年公布了国际上统一的流感病毒神经氨酸酶活性(NA,
Neuraminidase)及其活性抑制(NI,neuraminidaseinhibition)测定方法。
二、简介
反应原理
自由的N-乙酰神经氨(N-acetylneuraminic)神经氨酸酶的作用,自胎蛋白
底物中释放。经过碘酸盐的氧化作用,将N-乙酰神经氨酸神经氨酸转化为β-
甲醛丙酮酸(β-formylpyrruvicacid)。β-甲醛丙酮酸经硫代巴比妥酸的作用形成
生色团。用有机溶剂提取生色团。用分光光度计测定吸光值。这样可以测定标本
神经氨酸酶的活性,并且可确定用于神经氨酸酶抑制试验的标准剂量。神经氨酸
酶活性抑制试验是测定血清抑制标准量酶活性的效价。
NI测定已经成为流感病毒鉴定不可缺少的手段之一。因NI活性测定结果是
流感病毒神经氨酸亚型划分的主要依据之一。有时该方法也用于了解流感病毒
NA抗
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