烟酰胺高产菌种筛选及烟酰胺检测生产工艺优化正稿模板.docVIP

高酶活烟酰胺生产菌株筛选及腈水合酶催化反应条件优化

摘要

烟酰胺作为B族维生素关键组员，参与了机体内两种关键辅酶形成。烟酰胺作为关键营养性添加剂被广泛应用于应用于饲料生产行业，其在医药、食品、化妆品行业应用前景也很宽广。在工业生产方面，大家关键利用化学法和微生物法进行烟酰胺生产。烟酰胺微生物生产法有着化学法无法比拟优越性，此方法对环境几乎不造成污染，且生产成本低，工艺简便。

在本试验中，关键以下四个方面进行了试验研究并取得了一定结果：

(1)以试验室现有菌种HD1220为出发菌株，分别使用ARTP诱变、微波诱变、EMS诱变三种单因子诱变和在各因子最好诱变条件下复合诱变，确定了复合诱变最好条件为：ARTP诱变时间240s；微波诱变强度60%，微波照射时间90s，；EMS浓度0.8%。诱变完成后，筛选出一株能够稳定遗传且酶活高达1764U高腈水合酶活性菌株，和出发菌株相比，诱变后菌株酶活提升了33.13%，并将该菌株临时命名为NHD-1。

(2)利用HPLC对烟酰胺进行检测，经过对HPLC检测紫外检测波长、流动相流量、流动相百分比三个条件进行单原因优化试验，最终确定HPLC检测烟酰胺各个最优条件为：紫外检测波长为220nm，流动相流量为0.4mL/min，流动相中甲醇：水=1：3。在以上条件下，烟酰胺出峰时间为5.306min，和条件优化前相比，烟酰胺出峰时间显著缩