土壤淀粉酶的测定方法.docxVIP

淀粉酶测定（比色法）

本法是基于测定淀粉水解时生成的葡萄糖量来测知土壤的淀粉酶活性。

试剂

（1）2%淀粉

（2）甲苯

（3）3，5-二硝基水杨酸溶液：称取0.5克二硝基水杨酸，溶于20mL2mol/L氢氧化钠和50毫升水中，再加入30克酒石酸钾钠，用水稀释至100mL（不超过一周）。

（4）标准葡萄糖溶液：将葡萄糖先在50-58℃条件下，真空干燥至恒重。然后取500mg溶于

100ml蒸馏水中，即成葡萄糖标准溶液（5mg/ml）。再将此液稀释10倍制成葡萄糖工作液（0.5mg/ml）。

操作步骤

称取5g土，置于50mL三角瓶中，并加入1.5ml甲苯，15min后，注入10mL水和5ml2％淀粉溶液，摇匀混合物后，放入恒温箱，在37℃下培养5h。

另设无基质和无土对照。

培养结束时，加入35ml水，迅速过滤至50ml容量瓶，并用水定容。从中吸取滤液1mL，

注入25mL容量瓶中，加3mL3，5－二硝基水杨酸，并在沸腾的水浴锅中加热5min，随即

将容量瓶移至自来水流下冷却3min。溶液因生成3－氨基-5-硝基水杨酸而呈橙黄色，最后用蒸馏水定容至25mL，15min后在分光光度计上于波长508nm处比色。

每一土壤需做无基质对照，整个试验需做无土壤对照。

在分析样品的同