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研究人肺腺癌HCC827细胞对细胞因子的

杀伤敏感性

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如意!

肺癌的发病率逐年增高,目前其发病率和病死率

居恶性肿瘤的首位,传统的化学治疗效果已达到一个

平台期。近年来,分子靶向药物治疗以其毒副作用小、

安全性高等优点成为晚期非小细胞肺癌的主要治疗手

段。有研究表明,对于表皮生长因子受体(epidermal

growthfactorreceptor,EGFR)突变的患者,EGFR酪

氨酸激酶抑制剂(tyrosinekinaseinhibitor,TKI)较传统

化学治疗更能提高患者的反应率并延长其无进展生存

期。但大部分患者在平均治疗10个月后会发生耐药,

导致治疗失败。近年来有EGFR家族药物联合免疫生

物疗法治疗恶性肿瘤的相关研究,二者联合应用在提

高肿瘤临床缓解率的同时改善了晚期癌症患者的生存

质量。刘桂举等研究表明,作为EGFR-TKI的厄洛替

尼能提高野生型EGFR的肺腺癌A549细胞表面

NKG2D配体的表达,增加细胞因子诱导的杀伤

(cytokine-inducedkiller,CIK)细胞对A549细胞的杀伤

能力。本研究选取EGFR突变型肺腺癌细胞HCC827

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为研究对象,观察厄洛替尼及其下游分子磷脂酰肌醇

3-激酶(phosphatidylinositol3-kinase,PI3K)、丝分裂原

活化蛋白激酶(mitogen-activatedproteinkinase,

MAPK)、信号传导及转录激活因子3(signaltransducer

andactivatoroftranscription3,STAT3)、蛋白激酶

C(proteinkinaseC,PKC)对HCC827细胞表面NKG2D

配体表达的影响,探讨厄洛替尼是否提高EGFR突变

型肺腺癌细胞对CIK细胞杀伤的敏感效应。

1材料与方法

1.1细胞肺腺癌

HCC827细胞由本实验室常规传代培养。

1.2主要试剂与仪器

RoswellParkMemorialInstiute1640(RPMI1640)

培养基购自美国Gibco公司;CD3单抗购自美国

Pharmingen公司;乳酸脱氢酶杀伤活性检测试剂盒购

自美国Promega公司;MAPK抑制剂SB203580、PI3K

抑制剂LY294002、STAT3抑制剂STAT21、PKC抑

制剂Rottlerin购自美国Sigma公司;异硫氰酸荧光素

(fluoresceinisothiocyanate,FITC)标记的山羊抗小鼠

IgG1二抗购自北京中杉金桥生物技术有限公

司;MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3单抗及

流式细胞仪购自美国Becton,DickinsonandCompany

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