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溶液配制(同名3708)
实验室常用缓冲液配置方案
1×TEBuffer
组成浓度:10mMTris-HCl??1mMEDTAPH=8.0
配制量:500ml
配制方法:量取下列溶液于500ml烧杯中
????1MTris-HCl??BufferPH=8.0??5ml
????0.5MEDTA????PH=8.0??1ml
????向烧杯中加入约400mlddH2O均匀混合;将溶液定容到500ml后,高温高压灭菌;室温保存.
1)1MTris-HCl(pH8.0)
组份浓度:1MTris-HCl
配制量:1L
配制方法:
1.称量121.1gTris置于1L烧杯中。
2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3.加入42ml浓盐酸调节所需要的pH值。
4.将溶液定容至1L。
5.高温高压灭菌后,室温保存。
15)0.5MEDTA(pH8.0)
组份浓度:0.5MEDTA
配制量:1L
配制方法:
称取186.1gNa2EDTA·2H2O,置于1L烧杯中。
2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌。
3.用NaOH调节pH值至8.0(约20gNaOH)。
注意:pH值至8.0时,EDTA才能完全溶解。
4.加去离子水将溶液定容至1L。
5.适量分成小份后,高温高压灭菌。
6.室温保存。
实验室常用缓冲液配置方案
1)1MTris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)
组份浓度:1MTris-HCl
配制量:1L
配制方法:
1.称量121.1gTris置于1L烧杯中。
2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3.按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
PH值
浓HCl
7.4
约70ml
7.6
约60ml
8.0
约42ml
4.将溶液定容至1L。
5.高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2)10×TEBuffer(pH7.4,7.6,8.0)
组份浓度:100mMTris-HCl,10mMEDTA
配制量:1L
配制方法:
1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。
1MTris-HClBuffer(PH7.4,7.6,8.0)
100ml
500mMEDTA(PH8.0)
20ml
2.向烧杯中加入约800ml的去离子水,均匀混合。
3.将溶液定容至1L后,高温高压灭菌。
4.室温保存。
3)1.5MTris-HCl(pH8.8)
组份浓度:1.5MTris-HCl
配制量:1L
配制方法:
1.称量181.7gTris置于1L烧杯中。
2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3.用浓盐酸调节pH值至8.8。
4.将溶液定容至1L。
5.高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
4)3M醋酸钠(pH5.2)
组份浓度:3M醋酸钠
配制量:100ml
配制方法:
1.称量40.8gNaAc·3H2O置于100-200ml烧杯中,加入月40ml的去离子水搅拌溶解
2.加入冰醋酸调节pH值至5.2
3.加去离子水将溶液定容至100ml
4高温高压灭菌后,室温保存。
5)PBSBuffer
组份浓度:137mMNaCl,2.7mMKCl,10mMNa2HPO4,2mMKH2PO4
配制量:1L
配制方法:
1.称量下列试剂,置于1L烧杯中。
NaCl
8g
KCl
0.2g
Na2HPO4
1.42g
KH2PO4
0.27g
2.向烧杯中加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3.滴加浓盐酸将pH值调节至7.4,然后加入去离子水将溶液定容至1L。
4.高温高压灭菌后,室温保存。
注意:上述PBSBuffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1mMCaCl2和0.5mMMgCl2。
6)10M醋酸铵
组份浓度:10M醋酸铵
成分及终浓度
配制20ul溶液各成分的用量
10mmol/LdATP
10mmol/LdCTP
10mmol/LdGTP
10mmol/LdTTP
水
2ul100mmol/LdATP贮液
2ul
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