输血前免疫血清学检查课件.ppt

输血前免疫血清学检查;在检验医学中，没有几项检验像输血前检验一样，临床医生几乎完全依赖其结果的正确性。

输血前检验的每一个环节均可能发生差错，标本搞错最为常见。;急性溶血反应：多由ABO血型不相容输血引起，人为差错是其主要原因。

迟发性溶血反应：多由ABO以外血型不相容输血所致，输血前检验不规范是其主要原因。;三项检查：

●血型的鉴定

●抗体筛选和鉴定

●交叉配血试验;血型鉴定;ABO正定型采用单克隆抗-A、抗-B血型试剂，抗-B试剂不应该与获得性B抗原反应。;日常工作中需要定期做阳性/阴性对照，在可能的情况下，最好每天在使用定型试剂前作阳性/阴性对照，以检测其活性。;在正定型试剂中增加抗-AB、抗-A1及抗-H

抗-AB用来确认弱A和弱B抗原；抗-A1用来鉴定A亚型；抗-H用于鉴定亚型及孟买型。;一、人为因素

试剂不标准、失效或污染

操作中加错样本或试剂

离心速度不足或过度

细胞与血清比例不当，结果判断错误等

人工判读结果有可能发生书写错误;二、客观因素

因某种疾病（如白血病）导致抗原减弱

红细胞发生多凝集现象或产生类B物质

抗体效价低（如婴幼儿、老年人、低免疫球蛋白血症）

血清中有意外抗体，某些药物干扰等

可溶性血型物质过多

血浆蛋白异常导致红细胞缗钱状凝集或假凝集

嵌合体血型或近期输入异型血造成混合外观凝集;正反定型不一致应重新检测（应使用洗涤红细胞）;目的：检出有临床意义的抗体，并可在配血前有足够的时间来选择缺乏相应抗原的相配合的血液，避免盲目配血。;“有临床意义”的抗体：

如果某种特异性抗体曾引起新生儿溶血病、明显的溶血性输血反应或使输入的红细胞存活时间太短，即认为该种抗体有临床意义;抗体筛选的原则;筛选红细胞的要求;试剂筛选红细胞：

——特定的O型红细胞，通常为2-3人份的O型红细胞成为一套。每套试剂筛选红细胞中必须有下列抗原：

序Rh-hrKiddMNSsDuffyDiegoKellLewisP

号DCEceJKaJKbMNSsMurFyaFybDiaDibKkLeaLebP1

1++00+0+++0+0++0+0+0+0

2+0++0++0+0+/+00+0+0+0

3++++++0++0+0+00+0++++;抗体鉴定;;;国外对所有受血者常规作抗体筛选试验，并认为抗体筛选是检测不规则抗体最可靠、最敏感的方法。;输血前必须严格交叉配血，这是防止输血前检验程序中发生差错的最后一道“安全岗”。

所谓“严格”是指，所采用的方法必须能检出ABO不相容及ABO系统之外的有临床意义的抗体（IgG抗体）。;主侧交叉：由患者血清和供者红细胞组成;主侧配血

用患者血清与供

者红细胞进行试验

次测配血

供血者血清与患

者红细胞进行试验;交叉配血的要求;;※盐水法简便、快捷、价廉，但有局限性：

只能检出ABO、P、Lewis、MN等系统的抗体，此类抗体属天然抗体，属IgM；

不能检出Rh、Kell、Kidd、Duffy等系统的抗体，此类抗体由免疫产生，属IgG。;※酶法对Rh系统较为敏感，但会改变某些血型系统的抗原构型，加之不易保存，应用受限。;盐水介质配血方法;酶介质配血方法;离心

看结果;抗球蛋白配血方法;;;离心;凝胶卡式检测法;戴安娜凝胶卡式检测法的工作原理;将红细胞和抗血清加在凝胶上部反应，离心后观察

凝集的红细胞，被阻挡在小柱中凝胶的上部或中央，证明发生凝集反应，判断凝集反应阳性

游离的红细胞，被挤过装有过滤介质的小柱，而到达小柱的底部，证明未发生凝集，判断凝集反应阴性;结果判读模式;凝胶法鉴定ABO血型;;;凝胶卡式检测法的方法评价;;患者或供者ABO血型定型不正确；

患者血清中存在同种抗体，与供者红细胞上相应抗原起反应；

患者血清中存在自身抗体，与供者红细胞上相应抗原起反应；

患者血清中白蛋白与球蛋白比例不正常引起的缗钱状假凝集；

血浆扩容剂的影响或试剂被污染等。;患者或供者ABO血型错误（重新定型，检查患者亚型、输血史及移植史）;患者血清中的同种抗体与供者红细胞上相应抗原起反应

（对患者进行抗体鉴定，选择无对应抗原的血液输注）;患者血清中可能同时存在自身抗体和同种抗体（对患者血清自身吸收及抗体鉴定，用吸收后血