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2010级3班酶工程简答大正

1固定化酶和游离酶相比，有何优缺点？

解：优点（1）易将固定化酶和底物，产物分开产物溶液中没有酶的残留简化了提纯工艺（2）

可以在较长的时间内连续使用（3）反应过程可以严格控制，有利于工艺自动化（4）提高了

酶的稳定性（5）较能适于多酶反应（6）酶的使用效率高产率高成本低

缺点（1）固定化时酶的活力有损失（2）比较适应于水溶性底物（3）与完整的细胞相比，

不适于多酶反应

2、为什么酶制剂的生产主要以微生物为材料？

解：（1）微生物种类多，酶种丰富，且菌株易诱变，菌种多样（2）微生物生长繁殖快，酶

易提取，特别是胞外酶（3）来源广泛，价格便宜（4）微生物易得，生长周期短（5）可以

利用微电脑技术控制酶的发酵生产，可进行连续化，自动化，经济效益高（6）可以利用以

基因工程为主的分子生物学技术，选育和改造菌种，增加产酶率和开发新酶种

3、在生产实践中，对产酶菌有何要求？

一般必须符合下列条件：a)不应当是致病菌，在系统发育上最好是与病原菌无关b)能够利

用廉价原料，发酵周期短，产酶量高c)菌种不易变异退化，不易感染噬菌体

d)最好选用产胞外酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高

在食品和医药工业上应用，安全问题更显得重要

4、对酶进行化学修饰时，应考虑哪些因素？

解：（1）被修饰酶的性质，包括酶的稳定性，酶活性中心的状况，侧链基团的性质及反应性

（2）修饰反应的条件，包括PH与离子强度，修饰反应时间和温度，反应体系中酶与修饰

剂的比例等

5、列出用共价结合法对酶进行固定化时酶蛋白上可和载体结合的功能团

解：（1）酶蛋白N端的α氨基或赖氨酸的∑氨基（2）酶蛋白C端的羧基及天冬氨酸的β羧

基或谷氨酸的γ羧基（3）半胱氨酸的巯基1分（7）丝氨酸骆氨酸苏氨酸上的羟基（8）苯

丙氨酸和骆氨酸上的苯环（9）组氨酸上的咪唑基色氨酸上的吲哚基

6、

7举出四例，说明酶在医学上有广阔的用途。

（1）医药用酶：a.消化用酶：α、β－淀粉酶、胰酶、胰蛋白酶b.消炎用酶：木瓜蛋白酶、

菠萝酶c.溶纤维酶：尿酸酶、链激酶、溶栓酶d.肿瘤用酶：L－天冬酰胺酶、谷氨酰胺酶（2）

诊断用酶：a.尿酸酶：用于检测血液和尿液中的尿酸含量b.甘油激酶：由于检测血液中甘油

三酯的含量

（3）检测用酶：a.脱羧酶：由于检测L－赖氨酸和L－谷氨酸b.虫荧光素酶：用于检测ATP

8、培养基设计的一般步骤？

1

2010级3班酶工程简答大正

答：1.根据前人的经验和培养基成分确定时一些必须考虑的问题，初步确定可能的培养基成

分；2.通过单因子实验最终确定出最为适宜的培养基成分；3.当培养基成分确定后，剩下

的问题就是各成分最适的浓度，由于培养基成分很多，为减少实验次数常采用一些合理的实

验设计方法。

9、培养基成分选择考虑的问题？

答：1.菌种的同化能力2.代谢的阻遏和诱导3.合适的C、N比4.pH的要求

10、写出三种分离纯化酶蛋白的方法，并简述其原理

方法透析与超虑离心分离凝胶过滤盐析等电点沉淀共沉淀吸附层析电泳亲和层析热

变性酸碱变性表面变性等

离子交换层析原理：根据待分离物质带电性质不同的分离纯化方法。凝胶层析原理：利用某

些凝胶对于不同分子大小的组分阻滞作用的不同。大分子物质不能进入凝胶孔内，在凝胶颗

粒之间的空隙向下移动，并最先被洗脱出来；小分子物质可自由出入凝胶孔，流程长而后流

出层析柱。等电点沉淀法原理：蛋白质在等电点时溶解度最低；不同的蛋白质具有不同的等

电点使用方法：单独使用较少（用于从粗酶液中除去某些等电点相距较大的杂蛋白），多与

其它方法联使用（如盐析法、有机溶剂法），因蛋白质在等电点时仍有一定的溶解度.亲

和层析原理:利用生物大分子间特异的亲和力来纯化生物大分子.体通过适当的化学反应共价