基因工程的应用及蛋白质工程的崛起.ppt

2019新型冠状病毒的基因检测新型冠状病毒是RNA病毒，若直接通过RNA测序方法检测，速度会很慢。因此，目前的检测基本都采用反转录+实时聚合酶链式反应法（RT-PCR），扩增病原体的核酸，同时通过荧光探针实时检测扩增产物。这种方法很灵敏，也能够很好地定量。1.从RNA（或mRNA）反转录合成cDNA第一链：2.于95℃加热5～10min，灭活反转录酶，使RNA—cDNA杂交体变性，然后迅速冰浴冷却：3.PCR扩增：方法基本同PCR。题型一转基因植物的应用【例1】我国科学家利用基因工程技术将海藻合成酶基因转移到甘蔗体内,获得了抗旱、高产、高糖的甘蔗新品种。下列关于植物基因工程的说法,正确的是()A.我国转基因抗虫棉是转入了植物凝集素基因培育出来的B.可用于转基因植物的抗虫基因只有植物凝集素基因和蛋白酶抑制剂基因C.抗真菌转基因植物中,可使用的基因有几丁质酶基因和抗毒素合成基因D.提高作物的抗盐碱和抗干旱的能力,与调节渗透压的基因无关C1.4蛋白质工程的崛起动物基因工程技术的应用【例2】α1-抗胰蛋白酶缺乏症是一种单基因遗传病,患者成年后会出现肺气肿及其他疾病,严重者甚至死亡。利用基因工程技术将控制该酶合成的基因导入羊的受精卵,最终培育出能在乳腺细胞表达人α1-抗胰蛋白酶的转基因羊,从而更容易获得这种酶。下列关于该过程的叙述错误的是()A.载体上绿色荧光蛋白基因的作用是便于筛选含有目的基因的受体细胞B.将目的基因导入羊膀胱细胞中,将会更加容易得到α1-抗胰蛋白酶C.培养出的转基因羊的所有细胞中都含有该目的基因,故该羊有性生殖产生的后代也都能产生α1-抗胰蛋白酶D.目的基因与载体的重组过程需要DNA连接酶的催化作用C一、蛋白质工程崛起的缘由基因工程原则上只能生产自然界已存在的蛋白质，但这些天然蛋白质的结构和功能却不一定完全符合人类生产和生活的需要。例如：基因工程生产的干扰素可用于治疗病毒感染和癌症，但在体外保存却相当困难。改造干扰素（半胱氨酸）体外很难保存干扰素（丝氨酸）体外可以保存半年玉米中赖氨酸含量比较低天冬氨酸激酶（352位的苏氨酸）二氢吡啶二羧酸合成酶（104位的天冬酰胺）改造改造天冬氨酸激酶（异亮氨酸）二氢吡啶二羧酸合成酶（异亮氨酸）玉米中赖氨酸含量可提高数倍二、蛋白质工程的基本原理对天然蛋白质进行改造，你认为应该直接对蛋白质分子进行操作，还是通过对基因的操作来实现？1、目标：根据人们对蛋白质功能的特定需求，对蛋白质的结构进行分子设计。2、蛋白质工程的原理：改基因3、基本途径：基因DNA氨基酸序列多肽链蛋白质三维结构预期蛋白质功能分子设计mRNA翻译氨基酸序列多肽链DNA

合成转录折叠蛋白质三维结构生物

功能4、概念：蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求的工程技术。蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。三、蛋白质工程的进展和前景1、病毒外壳蛋白（coatprotein,CP）基因：病毒外壳蛋白（coatprotein,CP）基因主要作用就是作为合成外壳蛋白的模板，通过转录、翻译合成外壳蛋白，同病毒的遗传物质构成完整的病毒。在植物中表达病毒外壳蛋白基因可以阻止病毒的侵染或症状的产生。病毒外壳蛋白的抗性机理：一种假说认为，当入侵病毒的裸露核酸进入植物细胞后，它们立即被细胞中的自由CP所重新包裹，从而阻止了入侵病毒核酸的翻译和复制。在离体条件下，附加自由CP能够抑制末装配病毒的翻译的实验结果支持了上述假说；另一假说认为，抗性机制是在CP水平上抑制病毒脱壳，此说法最有力的证据是转基因植株可抗完整病毒的侵染．但不能抵御裸露病毒RNA的入侵；还有一种观点认为病毒外壳蛋白的抗性机制不是外壳蛋白在起作用，而可能是它的RNA转录物与入侵病毒RNA之间的相互作用2、病毒复制酶基因：RNA病毒（如烟草花叶病毒）的复制酶是依赖于RNA的RNA聚合酶。病毒复制酶一般是在病毒核酸进入寄主细胞并结合到寄主核糖体之后形成的。在植物中表达不完整的病毒复制酶基因可以显著提高植物对病毒的抗性，作用机制还不十分清楚，可能与基因转录后沉默有关。

反义基因

肝癌的发生、发展过程中许多癌基因及生长因子的基因产物大量表达，应用反义核酸在转录水平和翻译水平阻断某些基因的异常表达，以期阻断癌细胞内的异常信号传导，使癌细胞进入正常分化轨道或引起细胞凋亡，从而