核酸适配体在生化分离及检测领域的应用课件.pptVIP

核酸适配体在生化分离及检测领域的应用课件.ppt

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南昌大学信息工程学院InformationSchoolofNanchangUniversity核酸适配体在生化分离及检测领域的应用

目录核酸适配体的简介核酸适配体在生化分离中的应用核酸适配体在检测中的应用展望南昌大学信息工程学院Informationschoolofnanchanguniversity@骑着炮弹进城作品

一、简介一)基本概念1、核酸适体(Aptamer)是经体外筛选技术(SELEX)筛选出的能特异结合蛋白质或其它小分子物质的寡聚核苷酸片段,对可结合的配体有严格的识别能力和高度的亲和力。南昌大学信息工程学院Informationschoolofnanchanguniversity@骑着炮弹进城作品

2、核酸适体的被“配体指数富集系”(SELEX),它是以合化学技、PCR技以及基因克隆序技等的整合技。南昌大学信息工程学院Informationschoolofnanchanguniversity@骑着炮弹进城作品

二)核酸适配体的特点(1)适配体的分子结构:其是一种短链DNA或RNA序列(2)适配体与靶物质的结合基础:核酸分子形成的特定三维结构(3)适配体对靶分子有特异性和亲和力(4)适配体有易修饰性和稳定性南昌大学信息工程学院Informationschoolofnanchanguniversity@骑着炮弹进城作品

三)核酸适配体的筛选过程筛选方法的选择寡核苷酸文库的建立循环筛选测序及特异性修饰南昌大学信息工程学院Informationschoolofnanchanguniversity@骑着炮弹进城作品

SELEX筛选的基本过程:南昌大学信息工程学院Informationschoolofnanchanguniversity@骑着炮弹进城作品

二、核酸适配体在生化分离中的应用核酸适配体结合了抗体亲和技术及分子印迹技术两者的优点,不仅选择性专一而且具有性质稳定、易合成、易标记、分子量较小、目标分子广泛等优势,因此其在生化分离领域显示出广阔的应用前景。南昌大学信息工程学院Informationschoolofnanchanguniversity@骑着炮弹进城作品

应用实例:基于核酸适配体的微流体装置温控分离AMP设备基础:样品与适配体间有特异亲和性适配体构象受温度调控南昌大学信息工程学院Informationschoolofnanchanguniversity@骑着炮弹进城作品

基于适体的微流体萃取的原理AMP适配体的化学构型AMP的分子构型南昌大学信息工程学院Informationschoolofnanchanguniversity@骑着炮弹进城作品

南昌大学信息工程学院Informationschoolofnanchanguniversity@骑着炮弹进城作品

实验装置微流体装置SPE的示意图南昌大学信息工程学院Informationschoolofnanchanguniversity@骑着炮弹进城作品

实验结果表明:当温度达到32.5℃时解析率已达到93%,并且升温解析并不影响核酸适配体的循环使用。南昌大学信息工程学院Informationschoolofnanchanguniversity@骑着炮弹进城作品

局限性:当待分离的靶目标是蛋白质时,复合物的解离就比较困难。因为适配体对蛋白质的结合能力,比小分子大约强三个数量级,解离常数在纳摩尔范围内,有的甚至在皮摩尔范围内。这时复合物的解离就需要借助较高的温度、高浓度的盐水、较高或较低的pH值等激烈的条件,但在这样的条件下蛋白质的活性会降低甚至会发生变性。南昌大学信息工程学院Informationschoolofnanchanguniversity@骑着炮弹进城作品

二、核酸适配体在检测中的应用核酸适配体能够特异性地识别靶目标,这一性质使得适配体在检测领域大有用武之地。南昌大学信息工程学院Informationschoolofnanchanguniversity@骑着炮弹进城作品

目前核酸适配体已被应用在各类传感器中。比如电化学传感器、光学传感器以及声学传感器。其中针对核酸适配体在电化学传感器中的应用研究最多。南昌大学信息工程学院Informationschoolofnanchanguniversity@骑着炮弹进城作品

目前核酸适配体已被应用在了很多种检测手段中。比如色谱、毛细管电泳和生物传感器等。其中关于核酸适配体在亲和色谱和传感器中应用的报道最为广泛。南昌大学信息工程学院Informationschoolofnanchanguniversity@骑着炮弹进城作品

四、展望1.有关

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