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第一节概述Introduction 色谱法是一个主要分离分析方法，它是依据组分在两相中作用能力不一样而到达分离目标。一、历史Tswett研究植物色素分离，提出众谱法 概念；色谱分析法色谱分析法专题知识专家讲座第2页

ts色谱分析法专题知识专家讲座第3页

1941Martin和Synge提出液-液色谱理论；1952James和Martin发展了气相色谱；1956VanDeemter提出速率理论；1967Kirkland等研制高效液相色谱法；80年代以后 出现毛细管电泳和毛细管电动色谱等一系列新色谱分析方法。色谱分析法专题知识专家讲座第4页

二、分类按流动相分气相色谱（GC）液相色谱（LC）超临界流体色谱（SFC）按机理分吸附色谱分配色谱离子交换色谱排阻色谱色谱分析法专题知识专家讲座第5页

按固定相在支持体中形状分柱色谱平板色谱纸色谱薄层色谱按分离效率分经典液相色谱高效液相色谱色谱分析法专题知识专家讲座第6页

最新进展微柱色谱毛细管电动色谱三、基本概念与术语1、色谱流出曲线（chromatogram） 指样品注入色谱柱后，信号随时间改变曲线。色谱分析法专题知识专家讲座第7页

色谱流出曲线示意图WbW1/21/2h0.607h?色谱分析法专题知识专家讲座第8页

2、惯用术语（1）基线 无组分经过色谱柱时，检测器噪音随时间改变曲线。（2）峰宽 峰底宽Wb 峰半宽W1/2 标准偏差?色谱分析法专题知识专家讲座第9页

色谱参数示意图1/2h0.607hW1/2?WbtRt0色谱分析法专题知识专家讲座第10页

（3）保留值 保留时间tR——进样到出现色谱峰时间 保留体积VR——进样到出现色谱峰时消耗 流动相体积 死时间t0——流动相流过色谱柱时间 死体积V0——色谱柱空隙体积色谱分析法专题知识专家讲座第11页

校正保留时间校正保留体积F——流动相流动线速度（4）相对保留值色谱分析法专题知识专家讲座第12页

（5）分配系数和分配比（容量因子）分配系数： 一定温度与压力下两相达平衡后， 组分在固定相和流动相浓度比值分配比（容量因子）： 一定温度与压力下两相达平衡后， 组分在固定相和流动相量比值固定相重量流动相重量色谱分析法专题知识专家讲座第13页

K与k关系：（6）容量因子k与保留值关系色谱分析法专题知识专家讲座第14页

证实： 当组分二分之一流出众谱柱时色谱分析法专题知识专家讲座第15页

色谱基本保留方程色谱分析法专题知识专家讲座第16页

四、分离效能指标1、选择性（相对保留值） 相对保留值由两组分热力学性质决定，与色谱柱长短粗细无关。色谱分析法专题知识专家讲座第17页

2、峰宽度色谱分析法专题知识专家讲座第18页

3、分离度分离度考虑了保留时间和峰宽度，是一个综合指标：R1.0 两峰显著重合R=1.0 两峰达97.7%分离R?1.5 两峰完全分开色谱分析法专题知识专家讲座第19页

第二节 色谱理论一、塔板理论目标——从理论上得到描述色谱流出曲线方程，并经过这一方程各参数来研究影响分离原因。假设 （1）色谱柱存在多级塔板; （2）组分经过时在每级塔板两相间达 到一次平衡;色谱分析法专题知识专家讲座第20页

r——塔板数N——转移次数设：有A、B两组分，kA=2 kB=1/2当N=0 r=0A组分在两相分配达平衡后：流动相分量=固定相分量=r0r1r2。。。。。。。。rn色谱分析法专题知识专家讲座第21页

下表列出经过各级转移后组分在每一级塔板中量：色谱分析法专题知识专家讲座第22页

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r0r1r2。。。。。。。。rn当经过1次转移（N=1）以后：第0级塔板：r=0组分分量=第1级塔板：r=1组分分量=组分在两级塔板上量可表示为：若抽象成一个规律：色谱分析法专题知识专家讲座第24页

由上表能够看出，经N次转移后，组分在各级塔板上量符合二相式分布，即当N=4时，组分分布在5级塔板上：以A组分为例，5级塔板上分量分别是：色谱分析法专题知识专家讲座第25页

任一级塔板上分量为展开式对应一项，可用一个通式表示：当求最终一级塔板组分量时，r=n，以作图，即得色谱流出曲线，所以上式称为流出曲线方程。色谱分析法专题知识专家讲座第26页

tCtRCmax 对于两个组分A和B，假如k不一样，则流出曲线形状不一样：色谱分析法专题知识专家讲座第27页

因为所取得流出曲线在N很大时呈正态分布，所以可将流出曲线方程转化为正态分布方程形式：将此方程与标准正态分布曲线方程比较：可知：所以：色