《葡萄组织培养技术》-组培繁育流程.pptxVIP

葡萄组织培养与快繁技术;1.选取优良葡萄品种植株的顶梢为外植体材料。

2.表面消毒后，在超净工作台上剥离茎尖进行微茎尖培养。

3.成苗后进行病毒检测，无病毒的植株即为葡萄脱毒试管苗。

4.将脱毒试管苗繁殖成种苗

5.取脱毒试管苗或脱毒种苗的器官进行芽诱导培养。

6.形成的小苗进行壮苗、生根培养后，进行驯化移栽。;;一、葡萄组培快繁技术

（一）外植体的选择

茎尖、茎段、腋芽、叶片、叶柄、根尖、花粉、花药、胚、胚珠、胚乳、子房等，

整个器官、部分组织；

单个细胞、原生质体。;以茎段、茎尖为外植体时

应选择品种特性优良、生长健壮、无病虫害的休眠枝条，用0.01％的6-BA溶液浸泡24h，打破休眠，然后扦插到盛有无菌基质的苗床上，置于洁净的室内或培养箱中促使其萌发，温度控制在25～28℃。

若生长季节于田间取材，则要在晴天、无露珠时进行，然后将材料插入培养液或自来水中，置于室内或培养箱中进行预培养。;（二）芽的培养与诱导再生

1.取材与消毒

当催芽处理的材料长出新梢10～15cm时，取4～5cm的嫩梢，自来水冲洗15～30min，然后剪取1cm的茎尖。;2.接种和培养

无菌条件下，将芽放在解剖镜下用锋利的解剖刀切取0.5～1cm的茎尖，接种于事先准备好的诱导培养基上进行培养。

培养温度为25±2℃。接种1～2周暗培养，2周后光照（12～16h/d，1000～3000Lx）培养，15d后可见到不定芽长出。;（三）壮苗、生根与移栽

1.壮苗与生根培养

当不定芽长至2～3cm以上时，为了获得大量健壮的试管苗，就要从生长缓慢的诱导分化培养基中，将不定芽转接到生长快的壮苗生根培养基中培养。;表5-1葡萄组织培养培养基;2.炼苗与移栽

葡萄组培苗的驯化移栽多在春季或冬季的温室大棚中进行。

（1）光培炼苗

（2）沙培炼苗

（3）温室营养钵炼苗及大棚移栽

;（1）光培炼苗

当组培苗根长2～3cm、具有3～4片正常叶片时，转入温室或大棚内，开瓶在20000～40000Lx的自然光下炼苗3～7d，待叶片油亮、幼茎呈淡红色时，即可将生长势强、根系粗壮的试管苗从培养瓶中取出。;（2）沙培炼苗

清晨或傍晚，组培苗出瓶，栽入沙床，株距3～4cm，行距8～10cm。栽后沙床加盖小???棚。最初3d的棚内温度保持在（25±2）℃，最高不超过30℃，最低不低于20℃，相对湿度保持在80％～95％，光强逐渐增强到40000Lx。6～7d拆除拱棚。;（3）温室营养钵炼苗及大棚移栽

经沙培后的合格苗，在空气湿度不低于70％、温度20～25℃、散射光的条件下，栽入装有营养土:沙:腐熟有机肥＝1:1:0.2的营养钵中炼苗。待新叶长出后再定植到大田苗圃中。;