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医学微生物学与免疫学实验

医学微生物学与免疫学实验

实验目的

和要求

一、实验前务必做好预习，明确实验目的、内容及理

论依据等，避免或减少错误的发生，以保证实验在预

期内完成。

二、实验操作严格按要求进行，严防污染和感染。

三、对示教实验联系理论认真观察。对光镜下标本不

得擅自挪动视野，其他示教标本看后必放回原处。对

录像教学应作重点、简要的笔记。

四、客观真实地记录实验结果并进行分析，若与理论

不符，要加以分析讨论，找出原因，必要时重复实验。

五、在规定时间内完成实验报告，报告要求字迹清楚，

说明问题简单扼要。

实验室

规则

1.非实验必需品禁止带入实验室。

2.穿白大衣，按规定就坐。

3.实验室应保持安静和良好的秩序，不得高声谈笑、

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乱动物品或随便走动。

4.实验室内严禁吸烟、进食、饮水或用嘴湿润铅笔

和标签等，也不要用手搔抓抚摸机体。

5.实验时若不慎发生皮肤创伤，或病原菌污染衣物、

卓（地）面等事故，应立即报告指导老师，进行紧急

处理。

6.实验所用的玻片、试管、吸管等，用后应随即投

放盛有消毒剂的指定容器内，不得放在桌上，也不可

在水池中冲洗。

7.每次实验完毕，按实验要求应及时清理实验物品，

清扫卫生；离开实验室时，消毒洗手后离开实验室；

对白大衣经常清洗消毒。

油镜的使用

和维护

目的：掌握油镜的使用与维护，熟悉油镜的使用原理。

材料：显微镜，拭镜纸，液体石蜡油，二甲苯

原理：油镜的透镜极小，工作焦距最短，光线通过玻

璃和空气，由于介质密度不同发生折射，射入镜筒的

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光线极少，视野暗，物象不清晰。如在玻片与镜头（透

镜）之间加上折光率和玻片（n=1.52）相近的香柏油

（n=1.515）就可减少光线的折射，加强视野的亮度，

获得清晰的物象。

步骤：显微镜油镜的使用和维护

1.将显微镜平稳地安放在实验台适宜处。识别油镜

头：标有100×、OIL、HI等字样。

2.打开电源，用低倍镜对光，打开光圈，调节聚光

镜的位置，使视野光线充足。

3.标本上加镜油一滴，转动粗螺旋，使油镜头缓缓

下降，用眼从侧面观察，直到油镜头浸入油中接近玻

片为止。

4.从目镜观察，同时徐徐转动粗螺旋提升，见模糊

物象后再用细螺旋调节，直到见到清晰物象为止。

5.观察完毕，粗螺旋提高镜头，取下标本片，油镜

头使用后立即用擦镜纸擦净镜头上的油。如油已干，

可在擦镜纸上滴少许二甲苯擦拭，并立即用另一擦镜

纸擦去二甲苯，因二甲苯能溶解镜头上的固定胶以致

使镜头脱落。

6.将镜头转呈“八”字，调低聚光器，对号送入柜子

内存放。

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革

兰染色

目的：掌握革兰染色的原理及操作。

材料：干净玻片，接种环，葡萄球菌和大肠杆菌

18-24h培养后的混合菌液，酒精灯，一套革兰染液

原理：主要为细胞壁结构的差异。G+三维肽聚糖结构

的交联度大，通透性低，脂质少或无，酒精作用使孔

径缩小；而G-肽聚糖为二维疏松结构，薄，外膜含

大量脂质，易被酒精溶解，使细胞壁通透性增高，结

晶紫-碘复合物被酒精溶解而脱色。

步骤：

1.细菌标本的制作

（1）涂片：无菌操作。取一接种环混合细菌悬液，

涂布成直径约1cm的涂片，涂片应薄而均匀。

（2）干燥：涂片最好在室温中自然干燥。必要时可

将标本面向上，放在酒精灯上方微火处干燥。

（3）固定：标本面向上，在酒精灯火