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氧氟沙星葡萄糖注射液的无菌检查进行方法学验证

10.3.6.1试验目的：对氧氟沙星葡萄糖注射液的无菌检查进行方法学验证及对供试品进行无菌检查。

10.3.6.2试验仪器及药品：

10.3.6.2.1试验仪器：

HT-1300超净工作台苏净集团苏州安泰空气技术有限公司

生化培养箱广东医疗器械厂

HTY-Ⅲ智能集菌器杭州高得医疗器械有限公司

KSF集菌培养器杭州高得医疗器械有限公司

10.3.6.2.2供试品和试剂：

10.3.6.2.2.1培养基：硫乙醇酸盐流体培养基（用于好氧菌和厌氧菌）、改良马丁培养基（用于真菌）、改良马丁琼脂培养基、营养肉汤培养基（均由中国生物制品检定所提供）

10.3.6.2.2.2菌种：均由中国生物制品检定所提供

菌种名称??菌株编号??对应培养基

金黄色葡萄球菌Staphylococcusaureus??CMCC(26003??硫乙醇酸盐流体培养基

铜绿假单胞菌Pseudomonasaeruginosa??CMCC(10104??硫乙醇酸盐流体培养基

枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis??CMCC(63501??硫乙醇酸盐流体培养基

生孢梭菌Clostridiumsporogenes??CMCC(64961??硫乙醇酸盐流体培养基

白色念珠菌Candidaalbicans??CMCC(F)98001??改良马丁培养基

黑曲霉菌Aspergillusniger??CMCC(F)98003??改良马丁培养基

10.3.6.2.2.3供试品：氧氟沙星葡萄糖注射液（本公司自制）

规格：100ml：0.2g，批号：0502011、0502021、0502031

10.3.6.2.2.4稀释液、冲洗液及溶解液的制备：

0.1%蛋白胨水溶液取蛋白胨1.0g，加水1000ml，微温溶解，滤清，调节pH值至7.1±0.2，分装，灭菌。

0.9%无菌氯化钠注射液取0.9%氯化钠注射液（500ml/瓶）1瓶，灭菌保存。

10.3.6.3培养基的系统适用性检查

10.3.6.3.1无菌性检查

每批培养基随机取6瓶，在各自条件下培养14天，逐日观察，结果均无好氧菌、厌氧菌和真菌生长，符合无菌要求。

10.3.6.3.2灵敏度检查

10.3.6.3.2.1菌液制备

10.3.6.3.2.1.1接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中，33±0.5℃培养18h，用0.9%无菌氯化钠溶液稀释成1：103、1：104、1：105、1：106、1：107，再分别取1ml于培养基中，在33℃±0.5生化培养箱培养48h，计数，选择1ml含菌数少于100cfu（菌落形成单位）的菌悬液；

10.3.6.3.2.1.2接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中，33±0.5℃培养24h，接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中，26±0.5℃培养48h，上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液稀释成1：103、1：104、1：105、1：106、1：107，再分别取1ml于培养基中，分别在33℃±0.5生化培养箱48h和26±0.5℃生化培养箱培养72h，计数，选择1ml含菌数少于100cfu（菌落形成单位）的菌悬液；

10.3.6.3.2.1.3接种黑曲霉菌的新鲜培养物至改良马丁培养琼脂斜面培养基上，26±0.5℃

??空白??阴性对照管??无菌生长

结论：本品经无菌检查，符合规定。