基因工程的基本操作程序（第1课时）课件(共39张PPT1个视频)高二下学期生物人教版选择性必修3.pptx

第3章基因工程

普通棉花

(无抗虫特性)

3.将目的基因导

入受体细胞

导入、棉花细胞

表达Bt基因

重组DNA分子抗虫棉

4.目的基因的检测与鉴定

2.基因表达载

体的构建

(核心)

苏云金杆菌

提取

培育转基因抗虫棉的简要过程

1.目的基因的筛选与获取

与载体拼接

Bt基因

第二节

基因工程的基本操作程序

一、目的基因的筛选与获取

1.目的基因

(1)概念：用于改变受体细胞性状或获得预期表达产物等的基因

(2)种类：编码蛋白质的基因(主),具有调控作用的因子(次)

注意：不是所有的基因都编码蛋白质或肽链。

基因的种类一般分为结构基因、转录基因和调控基因。

结构基因的功能：

具有转录和翻译功能，能控制生物性状(编码蛋白质或肽链)。

转录基因的功能：

只有转录功能，没有翻译功能，能转录形成tRNA和rRNA。

调控基因的功能：

不能进行转录和翻译，只能调控其他基因的表达。

(如启动子、终止子等)

外显子：能转录相应的mRNA,进一步能编码蛋白质的DNA序列

内含子：在细胞核转录出mRNA后，在翻译前被剪切掉

编码区：能转录相应的mRNA,进一步能编码出蛋白质的DNA序列

非编码区：不编码蛋白质，含有能调控遗传信息表达的DNA序列

不编码蛋白质，含有能调控遗传信息表达的DNA序列(如启动子、终止子等)

启动子

终止子

启动子终止子

真核生物

原核生物

(3)基因的结构

非编码区：

编码区(转录区)

真核基因

原核基因

外显子内含子

编码区

非编码区

非编码区

原核细胞

真核细胞

不同点

编码区是_连续的

编码区是间隔的、不连续的

相同点

都由能够编码蛋白质的编码区和具有调控作用

的_非编码_区组成的

原核生物的基因：不能编码蛋白质的序列=非编码区

真核生物的基因：不能编码蛋白质的序列=非编码区+内含子

【总结】原核细胞与真核细胞的基因结构比较

2.筛选合适的目的基因

(1)较为有效的方法：从相关的已知结构和功能清晰的基因中进行筛选。

(2)实例：Bt抗虫蛋白基因(Bt基因)的筛选过程

苏云金杆菌的杀虫作用与Bt基因有关

掌握了Bt基因的序列信息

对Bt基因的表达产物Bt抗虫蛋白有了较为深入的了解

(3)认识基因结构和功能的技术方法

测序技术→序列数据库(如GenBank)→序列对比工具(如BLAST)

用苏云金杆菌制成的生物杀虫剂广泛用于防治棉花虫害

Bt基因是培育转基因抗虫棉较为

合适的目的基因

功能清晰

已知结构

Q1:Bt抗虫蛋白的抗虫原理是什么?

当Bt抗虫蛋白被分解为多肽后，多肽与害虫肠上皮细胞的特异

性受体结合，导致细胞膜穿孔，最后造成害虫死亡。

Q2:为什么Bt抗虫蛋白不会对人畜产生危害?

Bt抗虫蛋白只有在某类昆虫肠道的碱性环境中才能表现出毒性，

而人和牲畜的胃液呈酸性，肠道细胞也没有特异性受体，因此，Bt抗虫蛋白不会对人畜产生上述影响。

Q3:明确了目的基因后，该怎么获得它呢?

3.获取目的基因的方法

方法一：人工合成目的基因

①前提：目的基因比较小、核苷酸全部序列已知

②方法：DNA合成仪→直接合成目的基因

Q1:化学法合成的目的基因(含/不含)内含子、启动子和终止子?

不含；参与翻译的mRNA序列是由编码序列转录而来。

Q2:若是控制同一种蛋白质合成的目的基因，利用化学合成法合成的基

因可能有(一种/多种),理由是?

多种；遗传密码具有简并性或一种氨基酸可能由多个密码子决定。

Q3:化学合成法能(能/不能)合成自然界不存在的新基因，使生物

产生新的性状以满足人类的要求。

基因文库：将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因。

基因组文库：含有某种生物全部基因片段的重组DNA的克隆群体。

部分基因文库：含有某种生物部分基因片段的重组DNA的克隆群体，如cDNA文库。

基因组文库

部分基因文库(主要指cDNA文库)

与载体连接

OO

导入受体菌群

方法二：从基因文库中获取目的基因

基因组DNA

EcoRI酶切

基因文库

基因组文库

二二

将每个基因与载体连接，

导入不同受体菌中储存

构建

基因组文库

基因组文库中的基因含启动子、终止子和内含子!

提取某种生物的全部DNA

用适当的限制酶切割

基因组所有基因

基因组DNA

限制性内切酶裂解

①基因组文库的构建

DNA片段插入载体

导入受体细胞

②部分基因文库(如cNDA文库)的构建

某种生物(某一发育时期)的

(成熟的)单链mRNA

逆转录酶

与mRN