枸杞及其制品中3中有机酸的测定-气相色谱法.pdf

枸杞及其制品中3种有机酸的测定气相色谱法

1范围

本文件规定了枸杞中3种有机酸含量的气相色谱测定方法。

本文件适用于枸杞中琥珀酸、苹果酸、柠檬酸含量的测定和确证。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，

注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用本文件；不注日期的引用文件，其最

新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

样品经硫酸-甲醇溶液甲脂化衍生后，衍生产物经二氯甲烷萃取后进行气相色谱测定，

外标法定量。

5试剂和材料

除另有说明，所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水。

5.1试剂

5.1.1浓硫酸(HSO)：分析纯。

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5.1.2甲醇(CHOH)：色谱纯。

3

5.1.3二氯甲烷(CHCl)：色谱纯。

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5.2溶液配制

5.2.110%硫酸-甲醇溶液：准确量取10.0mL浓硫酸，缓慢加入到90mL甲醇溶液中，并搅

拌。

5.3标准品

琥珀酸标准物质：纯度均不低于95%，基本内容见附录A。

苹果酸标准物质：纯度均不低于95%，基本内容见附录A。

柠檬酸标准物质：纯度均不低于95%，基本内容见附录A。

5.4标准溶液制备

5.4.1琥珀酸标准储备液（25mg/mL）：准确称取适量的标准物质（5.3），用水溶解并定

容至10mL容量瓶中，制备浓度为25mg/mL的琥珀酸标准储备液。

5.4.2苹果酸标准储备液（25mg/mL）：准确称取适量的标准物质（5.3），用水溶解并定

容至10mL容量瓶中，制备浓度为25mg/mL的标准储备液。

5.4.3柠檬酸标准储备液（25mg/mL）：准确称取适量的标准物质（5.3），用水溶解并定

容至10mL容量瓶中，制备浓度为25mg/mL的标准储备液。

5.4.4混合标准工作曲线：分别移取0.02mL、0.04mL、0.08mL、0.20mL、0.40mL、0.80mL

的3种标准储备液于10.0mL容量瓶中（5.4.1），用10%硫酸-甲醇溶液定容至刻度，配制

成浓度为0.05mg/mL、0.10mg/mL、0.20mg/mL、0.50mg/mL、1.0mg/mL、2.0mg/mL的混合

标准工作曲线。静止22h后，转移至50mL刻度离心管，加入10mL纯水、10mL二氯甲烷

涡旋提取2min，离心，取下层有机相过滤膜上机测定。

6仪器和设备

6.1气相色谱仪：配有氢火焰离子化检测器（FID）。

6.2分析天平：感量为0.00001g和0.01g。

6.3高速离心机：15000r/min。

6.4涡旋混合器。

6.5具塞塑料刻度离心管：50mL。

6.6微孔滤膜（有机相）：0.22μm。

7分析步骤

7.1试样制备

枸杞随机取样500g，粉碎后充分混匀，放入聚乙烯瓶中或袋中。

7.2样品前处理

称取0.5g试样于50mL刻度离心管中，用10mL10%硫酸-甲醇溶液，盖上瓶盖静置22

h，加入10mL水，10mL二氯甲烷，涡旋混匀，离心5min，取下层液体过0.22μm滤膜后

上机测定。

7.3仪器参考条件

7.3.1气相色谱参考条件

a)毛细管柱：HP-5（30m×320μm×0.25μm),或相当者；

b)载气：高纯氮；

c)进样量：1μL；

d)流速：1.0mL/min；

e)进样模式：分流进样；

f)分流比：2:1；

g)进样口温度：260℃；

h)检测器温度：300℃；

i)程序升温条件见表1。

表1程序升温条件

速率℃/min数值℃保持时间(min)