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[课时作业] 单独成册 便利使用
1.(2023·广西桂林调研)有机磷农药是用于防治植物病虫害的含磷有机化合物,广泛应用于农业生产中,有时会造成瓜果蔬菜等食品农药残留超标,不少品种对人、畜的毒性很强,人误食后如不准时医治就会危及生命。某班同学欲从土壤中分别高效降解有机磷农药的微生物。请答复以下问题:
为了获得能降解有机磷农药的微生物菌种,可在被有机磷农药污染的土壤中取样,并在含有碳源、氮源及 等的选择培育基上添加 进展选择培育。
将获得的3种待选微生物菌种甲、乙、丙分别接种在1L含20mg有机磷农药的一样培育液中培育(培育液中其他养分物质充裕、条件适宜),观看试验开头到微生物停顿生长所用的时间,甲、乙、丙分别为32小时、45小时、16小时,则应选择微生物 (填“甲”“乙”或“丙”)作为菌种进展后续培育,理由是 。
制备固体培育基的根本步骤是计算→ →溶化→分装→加棉塞→包扎→ →倒平板。
假设要测定培育液中选定菌种的菌体数,既可在显微镜下用 直接计数,也可选用 法统计活菌数目。
解析:(1)微生物生存所需要的养分包括水、无机盐、碳源和氮源。因筛选降解有机磷农药的微生物,培育基中需添加适量的有机磷农药。(2)微生物可从降解的有机磷农药中获得特别养分,丙生长时间短,说明其对有机磷农药的降解速度较快。(3)制备固体培育基的根本步骤是计算、称量、溶化、分装、加棉塞、包扎、高压蒸汽灭菌、倒平板。(4)菌体数量可通过显微镜利用血细胞计数板直接计数,也可以利用稀释涂布平板法统计活菌数量。
答案:(1)水和无机盐有机磷农药(2)丙微生物丙分解有机磷农药的力气比
甲、乙强(3)称量高压蒸汽灭菌(4)血细胞计数板稀释涂布平板2.(2023·四川绵阳诊断)水中细菌总数可以作为判定被检水样被有机物污染程度的标志。在水质卫生学检验中,细菌总数是指1mL水样在牛肉膏蛋白胨琼脂培
养基中,经37℃、24h培育后,所生长出的菌落数。为初步测定某处池水中的细菌数目,试验的大致流程为:水样采集→梯度稀释→接种培育→菌落计数。答复以下问题:
对采集的池水进展梯度稀释时,应先将1mL水样参与 中以获得稀释10倍的稀释液。试验中对采集的池水要进展稀释的目的是 。
接种培育所用到的培育基中,能为细菌同时供给碳源和氮源的物质是
。
为保证菌落计数结果准确,一般选择菌落数在 的平板进展计数。用这种方法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目低,缘由是 。
试验过程中为确保培育基上菌落来自所采集水样,避开杂菌污染。试验中需要留意的具体操作有 (至少答2点)。
解析:(1)对池水进展稀释时,为了削减误差,所用水必需为无菌水,1mL水样稀释10倍,则需要加9mL无菌水;池水中细菌数目过多,在进展涂布培育时不简洁获得单个菌落,使计数误差较大。(2)稀释后的水样接种在牛肉膏蛋白胨琼脂培育基中培育,牛肉膏、蛋白胨均含有有机氮、糖类等有机物,故能为细菌同时供给碳源和氮源的物质是牛肉膏、蛋白胨。(3)为保证菌落计数结果准确,一般选择菌落数在30~300的平板进展计数。用稀释涂布平板法计数所得菌落数一般都会偏低,缘由是当两个或多个细胞连在一起时,平板上观看到的只是一个菌落。(4)为避开杂菌污染,具体操作时必需严格依据无菌操作的要求进展:试验者、操作台要进展消毒处理;所用容器均需灭菌;整个试验过程需要在酒精灯火焰旁进展等。
答案:(1)9mL无菌水避开池水中细菌数目过多(密度过大),得不到单菌落
牛肉膏、蛋白胨
30~300 当两个或多个细胞连在一起时,平板上观看到的只是一个菌落
采集水样的容器要灭菌,稀释和接种要在酒精灯火焰旁等3.土壤中有些细菌含有可降解尿素的脲酶。如下是某同学从土壤中筛选能降解
尿素的菌株的试验流程。请答复相关问题:
配制土壤溶液→系列稀释→涂布平板与培育→菌落计数
用以 为唯一氮源的培育基筛选能分泌脲酶的细菌。从功能上讲,该培育基属于 培育基。为了防止杂菌污染,培育细菌时必需在
条件下进展。
承受 法接种时需要将样液进展一系列的梯度稀释,然后接种培育、菌落计数。在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在 旁进展操作。将接种后的培育皿置于37℃恒温箱中倒置培育,将平板倒置的目的是 。(3)向培育基中参与酚红指示剂,假设培育基中存在可合成脲酶的细菌,其菌落四周会消灭红色,这是尿素被分解产生的 使酚红指示剂显色的结果。变色区域越大,说明该菌株降解尿素的力气 。
解析:(1)欲筛选出能降解尿素的菌株,配制培育基时应以尿素为唯一氮源,这样不能降解尿素的细菌在此培育基上就不能生存,这类培育基属于选择培育基。培育细菌时必需保证无菌操作。(2)
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