核酸的生物合成课件.pptVIP

當新形成的岡崎片段延長至一定長度，其3’-OH端遇到上一個岡崎片段時即停止合成。複製叉移動到終止區即停止複製（大腸桿菌有一個終止區）。這時會發生一系列變化：在DNA聚合酶Ⅰ催化下切除RNA引物；留下的空隙由DNA聚合酶Ⅰ催化合成一段DNA填補上；在DNA連接酶作用下，連接相鄰的DNA鏈；修復摻入DNA鏈的錯配堿基；以修復方式填補終止區50-100bp的空缺。這樣以兩條親代DNA鏈為範本，各自形成一條新的DNA互補鏈。結果是形成了兩個DNA雙股螺旋分子。（4）切除RNA引物，填補缺口，連接相鄰的DNA片段（複製終止）真核生物中DNA的複製特點1、真核生物染色體有多個複製起點，多複製眼，呈雙向複製，多複製子。2、岡崎片段長約200bp.3、真核生物DNA複製速度比原核慢。4、真核生物染色體在全部複製完之前起點不再重新開始複製；而在快速生長的原核中，起點可以連續發動複製。真核生物快速生長時，往往採用更多的複製起點。5、真核生物有多種DNA聚合酶。6、真核生物線性染色體兩端有端粒結構，防止染色體間的末端連接。由端粒酶負責新合成鏈5?RNA引物切除後的填補，亦保持端粒的一定長度。複製叉複製叉終止區端粒結構3?5?3?5?端粒結構端粒酶是含RNA的逆轉錄酶DNA複製的其他方式大腸桿菌雙鏈環狀DNA的複製（一個複製起點，雙向複製）真核細胞線狀染色體DNA的複製方式（多個複製起點，雙向複製）單向滾環式複製（噬菌體?X174DNA—單鏈環狀）3?D-環式複製方式（線粒體雙鏈環狀DNA：兩條鏈的複製起點不同位置，且複製不同步）定義:以RNA為範本，按照RNA中的核苷酸順序合成DNA稱為逆轉錄，由逆轉錄酶催化進行。1970年Temin和Baltimore同時分別從勞氏肉瘤病毒和小白鼠白血病病毒等致病RNA病毒中分離出逆轉錄酶，迄今已知的致癌RNA病毒都含有逆轉錄酶。用特異抑制物（放線菌素D）能抑制致癌RNA病毒的複製，而對一般RNA病毒的複製無影響。已知放線菌素D專門抑制以DNA為範本的反應，可見致癌RNA病毒的複製過程必然涉及到DNA。所以Temin於1964年提出前病毒的假說。四、逆轉錄+RNA+DNA-RNA+DNA-DNA+病毒RNA的逆轉錄過程（以前病毒形式引起整合到宿主細胞DNA中而使細胞惡性轉化）單鏈病毒RNARNA-DNA雜交分子雙鏈DNA（前病毒）逆轉錄酶逆轉錄酶逆轉錄酶是多功能酶，兼有3種酶的活性：RNA指導的DNA聚合酶活性DNA指導的DNA聚合酶活性核糖核酸酶H的活性，專一水解RNA-DNA雜交分子中的RNA，可沿5’?3’和3’?5’兩個方向起核酸外切酶的作用。逆轉錄酶也和DNA聚合酶一樣，沿5’?3’方向合成DNA，並要求短鏈RNA作引物。cDNA：幾乎所有真核生物mRNA分子的3‘末端都有一段polyA,當加入寡聚dT作為引物時，mRNA就可作為範本，在逆轉錄酶催化下在體外合成與其互補的DNA，稱為cDNA。逆轉錄酶發現的理論和實踐意義：不能把“中心法則”絕對化，遺傳資訊也可以從RNA傳遞到DNA。促進了分子生物學、生物化學和病毒學的研究，為腫瘤的防治提供了新的線索。目前逆轉錄酶已經成為研究這些學科的工具。1983年，發現人類免疫缺陷病毒（humanimmunedeficiencevirus,HIV）,感染T淋巴細胞後即殺死細胞，造成宿主機體免疫系統損傷，引起愛滋病（acquiredimmunodeficiencysyndrome,AIDS）五、DNA的損傷修復DNA的損傷：DNA在複製時產生錯配、病毒基因整合；某些物化因數如紫外光、電離輻射和化學誘變等，破壞DNA的雙螺旋結構。從而影響DNA的複製，並使DNA的轉錄和翻譯也跟著變化，因而表現出異常的特徵（生物突變）。若DNA的損傷或錯配得不到修復，會導致DNA突變。其主要形式：一個或幾個堿基被置換插入一個或幾個堿基一個或多個堿基對缺失DNA的損傷修復——四種修復途徑:光復活、切除修復、複組修復和誘導修復（亦稱暗修復）。光復活：400nm左右的光啟動光復活酶，專一分解紫外光照射引起的同一條鏈上TT（CCCT）二聚體。（包括從單細胞生物到鳥類，而高等哺乳動物無）切除修復：將DNA分子中的受損傷部分切除，以完整的那條鏈為範本再重新合成。特異內切酶、DNA聚合酶、DNA外切酶、DNA連接酶均參與。（發生在DNA複製前）重組修復（發生在複製後）：複製時，跳過損傷部位，新鏈產生缺口由母鏈彌補，原損傷部