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MLCK钙调蛋白结合位点突变体的构建及其对VSMC增殖和迁移的影响的开题报告
题目：MLCK钙调蛋白结合位点突变体的构建及其对VSMC增殖和迁移的影响
一、研究背景和意义：
血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖和迁移是心血管疾病和血管病变的重要病理生理基础，因此研究VSMCs增殖和迁移调控机制对于防治心血管疾病和血管病变具有重要意义。MLCK(myoosinlightchainkinase)是一种重要的酸性肌动蛋白(Actin)激酶，可以促进VSMCs增殖和迁移，而MLCK的活性受到钙调蛋白(CaM)结合的调节。因此，在本研究中，我们将通过构建MLCK与CaM结合位点的突变体，进一步探究MLCK/CaM互作对VSMCs增殖和迁移的影响，为心血管疾病和血管病变的防治提供新的理论基础。
二、研究内容和方法：
(1)构建MLCK与CaM结合位点的突变体：
通过PCR扩增MLCK基因的特定区域，引入特定突变，构建MLCK与CaM结合位点的突变体。
(2)突变体的纯化和鉴定：
通过细胞培养和蛋白纯化技术纯化该突变体，并通过Westernblot、质谱等技术鉴定其纯度和结构完整性。
(3)体外实验：
以VSMCs为研究对象，通过细胞实验方法测定构建的突变体对VSMCs增殖和迁移的影响。
三、预期结果：
我们预计通过构建MLCK与CaM结合位点的突变体，探究对VSMCs增殖和迁移调控机制的影响。预期结果将为心血管疾病和血管病变的防治提供新的理论基础，为探究因钙离子信号途径等原因发生的心血管疾病等提供新的线索。
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