SNT 1961.6-2013 出口食品过敏原成分检测 第6部分：实时荧光PCR方法检测胡桃成分.docxVIP

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T1961.6—2013

出口食品过敏原成分检测

第6部分：实时荧光PCR方法

检测胡桃成分

Detectionofallergencomponentsinfoodforexport—

Part6:RealtimePCRmethodfordetectingwalnutcomponents

2013-03-01发布2013-09-16实施

中国家华质量人监检检总发布

I

SN/T1961.6—2013

前言

SN/T1961《出口食品过敏原成分检测》共分为19部分：——第1部分：酶联免疫法检测花生成分；

——第2部分：实时荧光PCR法检测花生成分；

第3部分：酶联免疫吸附法检测荞麦蛋白成分；——第4部分：实时荧光PCR方法检测腰果成分；

——第5部分：实时荧光PCR方法检测开心果成分；——第6部分：实时荧光PCR方法检测胡桃成分；

——第7部分：实时荧光PCR方法检测胡萝卜成分；——第8部分：实时荧光PCR方法检测榛果成分；

——第9部分：实时荧光PCR方法检测杏仁成分；

—第10部分：实时荧光PCR方法检测虾/蟹成分；———第11部分：实时荧光PCR方法检测麸质成分；

——第12部分：实时荧光PCR方法检测芝麻成分；

——第13部分：实时荧光PCR方法检测小麦成分；

——第14部分：实时荧光PCR方法检测鱼成分；

———第15部分：实时荧光PCR方法检测芹菜成分；

——第16部分：实时荧光PCR方法检测芥末成分；

——第17部分：实时荧光PCR方法检测羽扇豆成分；——第18部分：实时荧光PCR方法检测荞麦成分；

——第19部分：实时荧光PCR方法检测大豆成分。本部分为SN/T1961的第6部分。

本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。

本部分起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国内蒙古出入境检验检疫局。本部分主要起草人：陈颖、王海艳、袁飞、吴亚君、徐宝梁、敖威华、赵治国、赵林立。

SN/T1961.6—2013

出口食品过敏原成分检测

第6部分：实时荧光PCR方法

检测胡桃成分

1范围

SN/T1961的本部分规定了食品中过敏原胡桃成分的实时荧光PCR检测方法。本部分适用于食品原料或加工食品中过敏原胡桃成分的定性检测。

本部分所规定方法的最低检出限(LOD)为0.01%(质量分数)。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

过敏原allergen

又称致敏原或变应原，是指能够引起变态反应的抗原。3.2

胡桃walnut

也称核桃属胡桃科的胡桃属，共包括12个种。这1p个种又被分为4大类，包括英国胡/核桃(Englishwalnut,Dioscaryon)类、黑胡/核桃类(Blackwalnut,Rhysocaryon)、亚洲白脱奶特类(Asianbutternut,Cardiocaryon)和美洲白脱奶特类(Americanbutternut,Trachycaryon)。

3.3

实时荧光PCRrealtimePCR

在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的积累实时监控整个PCR扩增过程。3.4

Ct值cyclethreshold

每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数。

4方法提要

样品经研磨后，提取DNA,以DNA为模板，采用胡桃过敏原蛋白Jugr2基因特异性检测引物和探针进行实时荧光PCR扩增，根据Ct值，判断样品中是否存在过敏原胡桃成分。

2

SN/T1961.6—2013

5试剂和材料

除另有规定外，所有试剂均为分析纯或生化试剂。实验用水应符合GB/T6682的要求。所有试剂

均用无DNA酶污染的容器分装。

5.1胡桃成分扩增引物和探针、内参照(真核生物成分)引物和探针详见表1。

表1试验用引物和探针

名称

序列

来源

内参照5’端引物

内参照3’端引物

内参照探针

5-CCTGAGAAACGGC