外界因素对细菌的影响课件.pptVIP

第三章消毒与灭菌消毒(disinfection)灭菌(sterilization)防腐(antisepsis)无菌法(asepticmethod)

消毒：应用物理或化学方法杀灭物体中的病原微生物，并不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物。灭菌：应用物理或化学方法杀灭物体中所有的病原微生物、非病原微生物及其芽胞、孢子的方法。消毒只要求达到无传染性的目的，对非病原微生物及其芽胞、孢子并不要求全部杀死。

防腐：应用各种化学药品或物理方法防止或抑制微生物生长繁殖的方法。无菌法：采取防止或杜绝一切细菌进入动物机体或其他物体的方法。以无菌法进行的操作称无菌操作。滤过除菌：指液体或气体通过滤过作用除去其中所存在的细菌。

第一节物理因素对微生物的影响n影响微生物的物理因素有：温度、辐射、超声波、滤过、干燥、光线、渗透压等。

一、温度对细菌的影响按细菌对温度的适应可分为：嗜冷菌、嗜温菌、嗜热菌按温度对细菌的影响有：最适温度、最高温度、最低温度

1.低温对细菌的影响n大多数微生物低温具有很的抵抗力.n环境温度最低生长温度：代谢活动降低，最后生长繁殖停滞，存活较长时间。n一般细菌菌种在冰箱5-10℃低温下保存。但也有些细菌对低温持别敏感，在冰箱内保存比在室温下保存死亡更快。如禽多杀性巴氏杆菌。

n冷冻干燥法：将保存物置玻璃容器内，在冷冻真空干燥器中迅速冷冻，然后抽去容器内的空气，使冷冻物中的水分在真空下直接升华而逐渐干燥，最后在真空下将玻璃容器焊封严密。在这样的冻干状态下，细菌及生物制剂可保存数月至数年而不丧失其活力。n冷冻干燥(冻干)法是保存菌种、疫苗等良好方法。

补充：为什么冷冻保存细菌时，温度必须迅速降低?n若温度缓慢下降，反可促使细菌死亡。这是因为温度逐渐降低可使水分形成结晶，细菌外的水分结晶可使菌体内水分外渗，引起电解质的浓缩与蛋白质变性；菌体内的水分结晶可破坏原生质的胶体状态并机械地损伤胞浆膜的完整性，造成细胞内物质外逸。n若将温度急速降低，则菌体内水分不形成结晶，原生质结成均匀的玻璃样状态。n此外，为减少细菌在冷冻时的死亡，可于菌液内加入10%左右的甘油、蔗糖或牛奶作为保护剂。

补充：反复冻融对微生物活力的影响反复冰冻与融化对任何微生物都具有很大的破坏力，因此保存菌种时应尽量避免。

2.高温对细菌的影响n高温对细菌有明显的致死作用，是最常用的有效的灭菌方法。n其原理多认为热力使菌体蛋白质变性或凝固，酶失去活性，导致细菌死亡。

干热灭菌法(火焰灭菌和热空气灭菌）①火焰灭菌法主要用于接种针、接种环、试管口等的灭菌。②热空气灭菌法用加热空气使灭菌物品温度升高到160℃并维持1～2小时以进行灭菌的方法。主要用于干燥的玻璃器皿如试管、吸管、玻璃注射器、培养皿等的灭菌。

干热灭菌注意事项：1.灭菌结束后，切记不可立即打开箱门，以免着火；2.灭菌物品不要堆放太紧，以免升温不均匀；3.灭菌时，要使温度逐渐上升，切忌太快。以免造成玻璃器皿的炸裂；4.不能耐受160℃高温的物品切勿干热灭菌。

湿热灭菌法：1.煮沸灭菌10-20min杀死所有细菌繁殖体；加入1%碳酸钠或2-5%石炭酸，灭菌的效果更好。

2.巴氏消毒法n用于葡萄酒、啤酒及牛乳等的消毒(不损失营养成分）。n低温维持巴氏消毒法：61-63℃（63-65），30min，然后迅速冷却至10℃左右。n高温瞬时巴氏消毒法：71-72℃，15s，然后迅速冷却至10℃左右。n超高温巴氏消毒法：使鲜牛奶通过温度不低于132℃的管道1-2s，然后迅速冷却至10℃左右(在常温下的保存期可达半年）。

3.流通蒸汽灭菌法100℃的蒸汽维持30min(不能杀死芽胞）4.高压蒸汽灭菌在一个加有少量水的密闭的金属容器内，通过加热来加大蒸汽压力，以提高温度，达到在短时间内完全灭菌的效果。

①高压蒸汽灭菌时压力与温度的关系n10磅(磅/平方英寸），115℃，n15磅，121℃，n20磅，126℃。

②高压蒸汽灭菌的适用范围n适用于培养基、生理盐水、某些缓冲液、针剂、玻璃器皿、金属器械、工作服等。n血清、血液、酶、氨基酸等，只能采用过滤除菌的方法。n糖类溶液或含糖的培养基可用10磅15~20min灭菌，若压力、温度过高则可使培养基颜色变深。

③高压蒸汽灭菌时注意事项n排冷空气n灭菌前要检查灭菌器内水位是否正常。n灭菌物品不要互相挤压过紧，以保证蒸汽通畅，使所有物品的温度均匀上升。n不耐热的塑料等材料切勿高压灭菌。

高压蒸汽灭菌锅构造1、压力表2、安全阀3、放气阀4、软管5、紧固螺栓6、灭菌桶7、筛架8、水手提式高压蒸汽灭菌锅

高压蒸汽灭菌锅使用方法1、加水至止水线；2、灭菌物品包裹好；3、开启放气阀；4、加热排气；5、达到预定表压，开始计时；6、关闭热源，当压力降至0.0