SCT7227-2017 传染性造血器官坏死病毒转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法.pdf

ICS65.020.30

B41

←：才－

中华人民共和国水产行业标准

SC/T7227一2017

传染性造血器官坏死病毒逆转录环介导等

温扩增（RT-LAMP）检测方法

Detectionmethodofreversetranscriptationloop-mediatedisothermalamplification

{RT-LAMP)forinfectioushaematopoieticnecrosisvirus

2017-12-22发布2018-06-01实施

中华人民共和国农业部发布

SC/T7227-2017

目U昌

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本标准由农业部渔业渔政管理局提出。

本标准由全国水产标准化技术委员会CSAC/TC156）归口。

本标准起草单位：全国水产技术推广总站、中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、深圳市检验检

疫科学研究院。

本标准主要起草人：贾鹏、郑晓聪、余卫忠、王津津、李清、刘莹、温智清、何俊强、于力、兰文升、史秀

杰、刘查、秦智锋。

I

SC/T7227-2017

传染性造血器官坏死病毒逆转录环介导等

温扩增（RT-LAMP）检测方法

1范围

本标准规定了传染性造血器官坏死病毒逆转录环介导等温扩增检测方法的试剂和材料、器材和设

备、操作步骤、结果判定和防污染措施

本标准适用于传染性造血

2规范性引用文件

下列文件对于本

件。凡是不注日期

GB/T6682

3缩略语

下列缩

scriptase)

dNTPs：脱

EDTA：乙二

IHNV：传染性

PBS：磷酸盐缓J

tion)

RNA：核糖核酸（ribonucle1

4概述

在IHNV基肉组5401bp~5701bp区域设计6条特异引物（参见附录A），在Est酶的作用下，

65℃恒温扩增30miw‘‘‘‘

变化判定结果。

5试剂和材料

5.1水：符合GB/T6682中一级水的规格。

5.2IHNV参考株：由农业部指定单位提供。

1

SC/T7227-2017

5.375%乙醇：用新开启的元水乙醇（分析纯）和DEPC水（见附录B中的B.1)配制，一20℃预冷。

5.4Trizol试剂，4℃保存。

5.5异丙醇：分析纯试剂，使用前预冷至一zo·c。

5.6？氯甲皖：分析纯试剂，常温保存。

5.7dNTPs：含dCTP、dGTP、dATP、dTTP。

5.8Bst酶：一20℃保存，酶浓度为8U/p.L，避免反复冻融。

5.9甜菜碱：浓度为5mol/L