革兰氏阴性需氧杆菌课件.ppt

三、微生物学诊断布氏杆菌病常表现为慢性或隐性感染,其诊断和检疫主要依靠血清学检查及变态反应检查。细菌学检查仅用于发生流产的动物和其他特殊情况。（一）细菌学检查1、病料流产胎儿的胃内容物、胎盘、羊水、阴道分泌物、乳汁和尿液等。2.诊断方法病料柯氏染色涂片镜检分离培养纯培养鉴定豚鼠血清抗体（二）血清学检查1.用已知抗体检测抗原用已知抗体检查病料中的布氏杆菌，或鉴定分离菌是否为布氏杆菌可用：荧光抗体技术反向间接血凝试验间接炭凝集试验免疫酶组化法2.用已知抗原检测抗体动物感染该菌7～15d出现抗体，检测抗体是布病诊断和检疫的主要手段。方法：玻板凝集试验虎红平板凝集试验乳汁环状试验试管凝集试验补体结合试验试管凝集试验操作按检疫规程进行。牛、马、骆驼血清凝集价1:100时判为阳性,1:50为可疑。羊、猪、狗等血清凝集价1:50为阳性,1:25为可疑。可疑病畜于3～4周后采血重检,如仍为可疑反应,牛、羊即可按阳性处理；猪、马则须视情况而定。虎红平板凝集试验取被检血清和虎红平板抗原各0.03ml,滴加于玻板上,混匀,在4～10min内出现任何程度凝集者即为阳性反应。乳汁环状试验为检查新鲜乳汁中抗体的方法,操作简便,准确性较高,常被用于畜群布氏杆菌病的监测。补体结合试验特异性和敏感性均较凝集试验高,是慢性布氏杆菌病一种可靠的诊断方法,已作为世界各国清除病畜的必要手段。规定1:10被检血清阻止溶血在50％以上,即为阳性反应。因补体结合反应的操作方法复杂,只在特殊情况下才应用。（三）变态反应检查变态反应现象一般在感染后的20～25d出现,因此不宜作早期诊断。本法适合于动物的大群检疫,主要用于绵羊和山羊,其次为猪。检测时,将布氏杆菌水解素0.2ml注射于羊尾根皱襞部或猪耳根部皮内,24及48h后各观察反应一次。若注射部发生红肿,即判为阳性反应。此法对慢性病例的检出率较高。四、免疫防治我国目前用的疫苗:M5弱毒活菌苗可用于牛、羊和鹿布病的预防。皮下注射或气雾免疫。免疫期羊1年半，牛、鹿各为1年。M90弱毒活菌苗同M5弱毒活菌苗。S2弱毒活菌苗可用于猪、羊、牛等动物，甚至可以接种怀孕动物而不引起流产。免疫方法采用饮水、气雾和皮下注射3种。免疫期猪为1年，牛和羊均为2年。是新建立的一个属,该属成员来自假单胞菌属Ⅱ群,现有30多种细菌,对人畜致病的主要有鼻疽伯克氏菌及伪鼻疽伯克氏菌。一、鼻疽伯克氏菌（B.mallei）鼻疽伯克氏菌,原名鼻疽假单胞菌,惯称鼻疽杆菌,为马、骡、驴等单蹄兽鼻疽病的病原体,也能感染人及其他家畜和多种野生动物。此病可呈急性或慢性经过,病变特征为皮肤、鼻腔粘膜、肺脏及其他实质器官形成典型的鼻疽结节和溃疡。（一）形态及染色G－中等大小杆菌,无芽孢、无荚膜、不运动。单独散在。美蓝染色可见异染颗粒,是本菌的形态特征。（二）生长要求及培养特性生长要求专性需氧,普通培养基中生长缓慢,加入适量甘油、血红蛋白、血液、血清或葡萄糖可促进生长,适温37℃,最适pH为6.4～6.8。培养特性甘油肉汤均匀浑浊生长，并逐渐形成灰白色粘稠沉淀，10～15d后液面形成灰白色菌环或菌膜。甘油琼脂24～48h后，形成灰白色至灰黄色中等大小菌落，直径2-3mm。马铃薯琼脂斜面:48h后，可出现棕黄色蜂蜜样的粘稠菌苔，随着时间的延长色泽逐渐变深。（三）致病性本菌在自然条件下主要感染马、骡、驴等单蹄兽,引起鼻疽病。骆驼、犬、猫等家畜以及狮、虎、豹、狼、狐、貂等野兽也可感染。牛、猪、绵羊、山羊及禽类不感染。人类偶尔也可经创伤或吸入含菌材料而受感染,并引起致死性疾病。实验动物猫和仓鼠最易感，豚鼠次之。接种细菌于雄性豚鼠腹腔后可引起典型的睾丸炎，睾丸肿胀化脓而后破溃，此反应称为:Strauss反应，具有一定诊断价值。Strauss反应革兰氏阴性需氧杆菌重要的革兰氏阴性需氧杆菌布氏杆菌属伯克氏菌属假单胞菌属波氏菌属弗朗西斯菌属布氏杆菌是多种动物和人布氏杆菌病的病原。该菌不仅危害畜牧生产,而且严重损害人类健康,因此在医学或兽医学领域都极为重视。一、主要生物学特性（一）形态及染色球杆状或短杆状,长0.6～1.5μm,多单在。不形成芽孢和荚膜,无鞭毛不运动。革兰氏染色阴性。柯氏染色法布氏杆菌呈红色,其他菌呈绿色或蓝色。布氏杆菌（二）生长要求与培养特性生长要求初代分离营养要求较高,培养基