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血清肌酸激酶MB同工酶测定

1检验目的

指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果

的准确。

2实验原理

使用CK-M多克隆抗体对肌酸激酶（CK）中CK-M同工酶

的活性进行抑制后，采用德国临床化学会（DGKC）和国际临

床化学会（IFCC）推荐的连续监测法测定余下的肌酸激酶

（CK）活性。其反应原理如下：

⑴CK-MM型同工酶+CK-M抗体→CK-MM型同工酶的活

性被抑制；CK-MB型同工酶+CK-M抗体→50%的CK-MB型

同工酶的活性被抑制；

⑵剩余的50%无活性的CK-MB型同工酶+N-乙酰半胱氨

酸→有活性的CK-B型同工酶

CK同工酶

⑶磷酸肌酸+ADP肌酸+ATP

己糖激酶(HK)

ATP+葡萄糖ADP+葡萄糖-6-磷酸

(G6P-DH)

+

葡萄糖-6-磷酸+NADP6-磷酸葡萄糖酸

+

+NADPH+H

式中：ADP为二磷酸腺苷；ATP为三磷酸腺苷；NADP+为

氧化型辅酶II；NADPH+H+为还原型辅酶II。

在上述反应中，NADPH+H+的生成速率与样本中肌酸激酶

B型同工酶（CK-B）的活性成正比。通过在波长340nm处监

测吸光度值的上升速率，即可测得样本中肌

酸激酶B型同工酶（CK-B）的活性。肌酸激酶B型同工

酶（CK-B）活性相当于1/2肌酸激酶MB型同工酶的活性，

将所测得的肌酸激酶B型同工酶（CK-B）的活性乘以2，即

为肌酸激酶MB型同工酶（CK-MB）的活性。

3标本：

3.1病人准备：无特殊。

3.2类型：血清或肝素血浆。

3.3标本存放：稳定性：-20℃保存稳定4周（避光保存）。

活性损失：2～8℃保存24小时或18～22℃保存1小时至少

损失10%。

3.4标本运输：常温条件下保存运输。血标本应尽快送往化

验室,室温下放置30―45分钟,后离心,放置时间不得超过3h.

血清必须吸出,转移至有盖的试管中.

3.5标本拒收标准：细菌污染的标本。

4实验材料

4.1试剂：上海复星长征医学科学有限公司CK-MB试剂盒（沪

食药监械（准）字2014第2400166号YZB/沪1546-40-2014）

4.1.1试剂组成

试剂1（R1）：

D-葡萄糖27mmol/L咪唑缓冲液

60mmol/L

乙酸镁14mmol/LNADP

2.7mmol/L

N-乙酰半胱氨酸27mmol/LAMP

7mmol/L

试剂2（R2）：

磷酸肌酸160mmol/L6-磷酸葡萄糖脱氢酶≥

20KU/L

ADP11mmol/L糖激酶≥

20KU/L

CK-M抗体

4.1.2试剂准备：试剂为即用式。

4.1.3试剂稳定性与贮存：2～8℃避光、密封的储存条件下，

试剂（盒）自生产之日起有效期为12个月。试剂1与试剂

2启用后，在2～10℃避光的条件下可稳定20天。

4.1.4变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，

或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使