人教版高中生物选择性必修第3册 生物技术与工程 第1章 发酵工程 第2节 二 微生物的选择培养和计数.pptVIP

二微生物的选择培养和计数第1章

内容索引0102课前篇自主预习课堂篇探究学习

素养目标

课前篇自主预习

一、选择培养基1.自然界中目的菌的筛选(1)实例:聚合酶链式反应(PCR)中用到的耐高温的DNA聚合酶,就是从热泉中筛选出来的水生栖热菌中提取出来的。(2)依据:水生栖热菌能在70~80℃的高温条件下生存,而绝大多数微生物在此条件下不能生存。?

2.实验室中目的菌的筛选(1)原理:人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度和pH等),同时抑制或阻止其他微生物的生长。(2)方法:利用选择培养基分离。①选择培养基:在微生物学中,允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。②实例:选择分解尿素的细菌的培养基,以尿素作为唯一氮源,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,在培养基上生长。

自我检测1.人为提供有利于目的微生物生长的条件(如营养、温度和pH等),同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基为选择培养基,判断下列有关选择培养基的表述是否正确。(1)筛选分解尿素的细菌的培养基以尿素为唯一氮源,且为液体培养基。(×)(2)能分解尿素的细菌之所以能分解尿素,是因为其能产生脲酶。(√)(3)能分解尿素的细菌分解尿素生成了氨气,会导致培养基pH升高,可以通过在培养基中添加酚红指示剂来分离出该细菌。(√)(4)从自然界中筛选目的菌株的原理是根据目的菌株对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。(√)

2.选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物,通过不含有机物的培养基、缺氮培养基、含尿素(不含其他氮源)的培养基,可从土壤中分离出的微生物依次是()A.硝化细菌、放线菌、根瘤菌B.根瘤菌、青霉菌、固氮菌C.异养型细菌、放线菌、硝化细菌D.自养型细菌、固氮菌、分解尿素的细菌

答案D解析不含有机物的培养基中能筛选出自养微生物,如硝化细菌;缺氮培养基可以筛选固氮微生物,如固氮菌;含尿素(不含其他氮源)的培养基能筛选含脲酶的微生物,如分解尿素的细菌。

二、微生物的选择培养

自我检测1.稀释涂布平板法通过观察菌落特征,对混合菌进行分离,也可以用于微生物的数量测定,判断下列有关稀释涂布平板法的表述是否正确。(1)选择培养基筛选出的微生物只有一种。(×)(2)土壤样品稀释时不同的微生物应该选择不同的稀释度。(√)(3)选择培养基上的菌落数目明显少于牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目,说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落。(√)(4)用涂布器将菌液均匀涂布在培养基表面后,应立即将平板倒置,并放入恒温培养箱中进行培养。(×)

2.(2021吉林长春实验中学高二月考)苯酚是工业生产排放的有毒污染物质,自然界中存在着降解苯酚的微生物,某工厂产生的废水中含有苯酚,为了降解废水中的苯酚,研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株,筛选的主要步骤如下图所示,①为土壤样品。下列相关叙述错误的是()A.使用平板划线法可以在⑥上获得单个菌落B.如果要测定②中活细菌数量,常采用稀释涂布平板法C.图中②培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源D.微生物培养前,需对培养基和培养器皿进行消毒处理

答案D解析从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株,则培养微生物的培养液中只能提供苯酚作为唯一的碳源。③是筛选,④⑤是纯化培养,⑥是获得单个菌落。分析图示可知,经过纯化培养后,使用平板划线法可以在培养基上获得单个菌落,A项正确;接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法,但其中只有稀释涂布平板法可用于对微生物进行计数,因此测定②中活细菌数量,常采用稀释涂布平板法,B项正确;本次培养的目的就是筛选出能降解利用苯酚的细菌菌株,图中②培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为唯一碳源,C项正确;微生物培养应注意无菌操作,微生物培养前,需对培养基和培养器皿进行灭菌处理,D项错误。

三、微生物的数量测定1.稀释涂布平板法(1)原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个单菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。(2)计数原则①一般选择菌落数为30~300的平板进行计数。样品的稀释度将直接影响平板上的菌落数目,通常选用一定稀释范围的样品液进行培养。②在同一稀释度下,应至少对3个平板进行重复计数,然后求出平均值。

(3)统计结果①统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示。②统计的菌落数往往比活菌的实际数目少,这是因为当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。2.显微镜直接计数法(1)统计工具:利用特定的细菌计数板或血细胞计数板。(2)统计方法:在显微镜下观察、计数,然后再计算一定体积的样品中微生物的数