人教版高中生物选择性必修第3册 DNA技术的基本工具.pptVIP

第三章基因工程

苏云金杆菌毒蛋白基因毒蛋白杀死害虫棉花细胞抗虫棉的培育什么是目的基因？什么是受体细胞？什么是目的基因的表达产物？

基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外____________和____________等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做__________技术。DNA重组转基因DNA重组一、基因工程的概念

理论基础1.DNA的基本组成单位相同(都是四种脱氧核苷酸)2.都遵循碱基互补配对原则3.DNA分子的空间结构都是规则的双螺旋结构理论基础1.基因是控制生物性状的结构与功能单位2.遗传信息传递都遵循中心法则3.生物界几乎共用一套遗传密码基因工程的诞生理论基础

3.1重组DNA技术的基本工具

磷酸酯键

基因工程是在DNA上进行的______水平的设计施工，需要有专门的工具。分子限制性内切核酸酶（简称__________）限制酶

限制酶的专一性体现在：一种限制酶能够识别双链DNA分子的_______________，并且使每一条链中特定部位的______________断开。大肠杆菌中的一种叫做EcoRI的限制酶，能够专一识别DNA中的__________序列，并在G和A之间将这段序列切开（实质是在________________与__________________之间切断磷酸二酯键）。特定核苷酸序列磷酸二酯键GAATTC腺嘌呤脱氧核苷酸鸟嘌呤脱氧核苷酸1.限制性核酸内切酶——“分子手术刀”

黏性末端黏性末端（1）实例1—EcoRⅠ限制酶：EcoRⅠ识别序列为GAATTC，EcoRⅠ切割部位为GA之间的磷酸二酯键。（2）实例2——SmaⅠ限制酶：SmaⅠ识别序列为CCCGGG，SmaⅠ切割部位为CG之间的磷酸二酯键。平末端

SmaI能够专一识别DNA中的_________序列，并在______之间将这段序列切开（实质是在鸟嘌呤脱氧核苷酸与胞嘧啶脱氧核苷酸之间切断磷酸二酯键）。当限制酶在它识别序列的__________________将DNA的两条链分别切开时，产生的是______末端，而当限制酶在它识别序列的_____________切开时，产生的则是平末端。EcoRI切割DNA产生______末端，SmaI切割DNA产生______末端。GGGCCCG和C中心轴线两侧黏性中心轴线处黏性平1.限制性核酸内切酶——“分子手术刀”

1、已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—GGATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。（1）能被限制酶I切割的DNA，______（能/不能）被限制酶II切割；（2）能被限制酶II切割的DNA，____________（能/不能/不一定能）被限制酶I切割。能不一定能练习

现有来自两种生物的DNA片段1和DNA片段2，用同一种限制酶处理后，DNA片段1和2带有______的黏性末端。在一个混合体系中，DNA片段1和2随机碰撞在一起时，黏性末端之间会自发形成______，但不同DNA片段骨架上的缺口无法自动连接。DNA连接酶的作用是：将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被________切开的两个__________之间的____________。相同氢键限制酶核苷酸磷酸二酯键2.DNA连接酶——“分子缝合针”

类型E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶来源________________________功能只缝合____________缝合____________和____________结果恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的_________________大肠杆菌T4噬菌体黏性末端黏性末端平末端磷酸二酯键DNA连接酶的种类和特点

DNA连接酶的作用示意图DNA聚合酶的作用示意图

通常是利用______作为载体，将目的基因送入受体细胞中。质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有__________能力的很小的双链_____DNA分子。在基因工程中使用的载体除质粒外，还有____________、__________等。质粒自我复制环状噬菌体动植物病毒大肠杆菌及质粒结构模式图3.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”

质粒作为运载体的优点：①质粒DNA分子上有一个至多个限制酶切割位点，便于_____________________；②质粒含有复制原点，可在受体细胞中进行自我复制，或整合到受体细胞_______上；③质粒DNA分子上有特殊的____________，如四环素抗性基因、氨苄青霉素抗性基因等，供重组DNA的_