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第2节动物细胞工程一动物细胞培养
新课程标准核心素养1.阐明动物细胞培养的条件和过程。2.阐述干细胞在生物医学工程中广泛的应用价值。1.科学思维——构建动物细胞培养的流程图,认同动物细胞培养是动物细胞工程的基础。2.社会责任——理性客观地分析干细胞在临床上的应用所产生的效益与风险。
动物细胞工程动物细胞工程常用的技术包括_____________________、_______、_____________等,其中________________是动物细胞工程的基础。动物细胞培养动物细胞核移植动物细胞培养提出问题:动物细胞培养需要哪些条件?动物细胞培养的基本操作过程是什么?动物细胞融合
从社会中来在治疗大面积烧伤时,通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说,自体健康皮肤非常有限,使用他人皮肤来源又不足,而且会产生免疫排斥反应。那么,怎样才能获得大量的自体健康皮肤?能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤?科学家对皮肤干细胞进行培养,获得适合临床上使用的人造皮肤;
一、动物细胞培养概念动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织,将它分散成______________________,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和_____________________的技术。单个细胞增殖二、动物细胞培养的条件1.营养(1)糖类、______________________、无机盐、维生素等(2)___________________:补充培养液中尚未研究清楚的成分氨基酸血清、血浆
2.无菌、无毒的环境(3)更换__________________,及时清除代谢废物(1)培养液和_______________________都灭菌处理(2)在_______________环境下进行操作培养工具无菌培养液3.温度、PH和渗透压(2)pH:多数动物细胞生存的适宜PH为_______________________(1)温度:哺乳动物多以____________________℃为宜36.5±0.57.2~7.4
4.气体环境(1)__________:维持培养液的PH(2)__________:细胞代谢所必需的,供细胞进行有氧呼吸。CO2O25.小结无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境糖类、氨基酸、无机盐、维生素……营养条件其他条件动物细胞培养所需的基本条件
三、动物细胞培养的过程取动物组织因成块组织,细胞与细胞靠在一起,限制了细胞的生长和繁殖。用机械方法,或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理的方法,将组织分散成单个细胞制成细胞悬液转入培养液中进行原代培养原代培养:指动物组织经处理后的初次培养。一般取自幼龄动物的器官或组织,因为这些组织或器官的生命力旺盛,分裂能力强。
放入CO2培养箱中培养(适宜环境)传代培养:分瓶后的细胞培养。传代培养时,悬浮生长的细胞直接用_______________法收集;贴壁生长的细胞要先用__________________等处理,再用________________法收集。离心胰蛋白酶离心传代培养分瓶培养
1.体外培养的动物细胞类型:(1)悬浮生长:悬浮在_____________________中生长繁殖。密度过大时,由于______________________积累和培养液中____________________,细胞分裂受阻。(2)细胞贴壁:多数细胞贴附在___________________上生长。瓶壁培养液有害代谢物营养物质缺乏2.接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面_____________________时,细胞________________________的现象称为细胞的接触抑制。相互接触停止分裂生长
区分两种“培养”的关键是看用_______________________处理的对象。3.原代培养和传代培养区分胰蛋白酶①第一次:用胰蛋白酶对剪碎的_______________________进行处理,使其分散成_______________________后进行培养,为原代培养。②第二次:细胞培养过程中出现__________________,用胰蛋白酶使其从瓶壁上脱离下来,然后,将其分散到多个培养瓶中继续培养,为传代培养。动物组织单个细胞接触抑制
思考与讨论1.幼龄动物的细胞和老龄动物的细胞比较,分化程度低的细胞与分化程度高的细胞比较,哪些细胞更易于培养?为什么?提示:细胞的增殖能力与供体的年龄有关,幼龄动物的细胞增殖能力强,有丝分裂旺盛,老龄动物的细胞则相反。所以,一般来说,幼龄动物的细胞比老龄动物的细胞易于培养。同样,分化程度越低的细胞,增殖能力越强,所以更容易培养
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