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水体日本血吸虫感染性监测哨鼠监测法

1范围

本标准规定了哨鼠监测法开展水体日本血吸虫感染性的监测方法。

本标准适用于各级疾病预防控制机构对可疑水体日本血吸虫感染性的监测。

2规范性引用文件

下列文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注明日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本标准；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。

GB14925实验动物环境及设施

GB19489实验室生物安全通用要求

GB/T35892实验动物福利伦理审查指南

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

3.1

哨鼠Sentinelmice

用于测定自然水体是否感染日本血吸虫的实验用小白鼠。

3.2

哨鼠监测法Sentinelmicemethod

将哨鼠浮放于自然水体中一定时间，经过饲养一定时间进行哨鼠解剖查虫的水体血吸虫感染性监测技术。

3.3

日本血吸虫schistosomiasisjaponicum

凡寄生于脊椎动物血管内的吸虫被称为血吸虫，隶属扁形动物门，吸虫纲、复殖目、裂体科、裂体属。在我国寄生于人畜（兽）并致人畜（兽）共患的血吸虫属日本血吸虫，引起日本血吸虫病。

3.4

日本血吸虫尾蚴Schistosomajaponicumcercaria

日本血吸虫幼虫发育过程中的一个阶段，为血吸虫的感染期。尾蚴属于叉尾型，蚴体由长圆形的躯干和细长的尾部组成，有口吸盘及\o腹吸盘（页面不存在）腹吸盘，肠道分两支；大小为280～360μm×60～95μm。

3.5

水体感染性Waterinfectivity

指含有日本血吸虫尾蚴的水体，其感染性以哨鼠感染率和哨鼠虫负荷表示。

4缩略语

下列缩略语适用于本文本。

GPS：全球定位系统(GlobalPositioningSystem)

5实验器材

5.1仪器设备

小型木架、哨鼠笼、电动哨鼠监测船、伸缩杆、饲养笼。

5.2试剂材料

5.2.1异氟烷、生理盐水（0.9%的\t/item/%E7%94%9F%E7%90%86%E7%9B%90%E6%B0%B4/_blank氯化钠溶液）

5.2.2解剖剪、眼科摄、玻璃培养皿

5.2.3其他手套、小鼠饲料

6监测方法

6.1哨鼠投放

采用鼠笼法，每点放置20只哨鼠，雌雄各半（雌鼠25±3g、雄鼠28±3g），每笼10只。每笼间隔10～20m，要求哨鼠腹部、四肢以及尾部接触水体，见附录A。

6.2水体感染性测定步骤

6.2.1选择监测点，根据环境类型和大小，确定监测点及其数量，并根据环境选择不同哨鼠载具，见附录B。记录放置哨鼠时气温、水温及水的流速和监测点等相关信息并进行GPS定位。

6.2.2在监测点上游和下游各500m范围内进行缓慢拖曳，保持匀速，拖曳时速≤3Km/hr，防止哨鼠呛水。

6.2.3每天于10:00-14:00测定4小时，连续测定2天。

6.2.4现场测定时，观察哨鼠状态，记录哨鼠丢失或死亡数量。见附录B

6.3哨鼠饲养

将存活的哨鼠带回实验室饲养35±2天，见附录C1。

6.4哨鼠解剖

将哨鼠麻醉后采用断髓法处死小鼠，解剖观察小鼠肝脏是否有肉芽肿、成虫，肝门静脉和肠系膜是否有血吸虫成虫。所有检出的血吸虫在解剖镜下观察，区别雌雄虫、雌雄合抱并记数，见附录C2。

6.5统计指标

计算哨鼠感染率和哨鼠虫荷数，见附录D。

附录A

（规范性）

A.1哨鼠监测法操作流程

A.1.1哨鼠装笼：取2只哨鼠测定笼和20只不同性别小白鼠（雌雄各10只），打开笼盖，用镊子夹住哨鼠尾部，在每只测定笼中加入哨鼠10只（每格2只），关上笼盖并扎紧笼口，防止拖放途中笼口张开哨鼠外逃。

A.1.2哨鼠笼投放：上午10点开始将装有哨鼠的笼放置到监测点拟测定的水面，调整哨鼠笼浮起高度，以哨鼠四肢、腹部、尾部接触到水体为宜。2个测定笼水体间隔为10～20m。

A.1.3哨鼠笼回收：下午2点收回测定笼，打开盖子用镊子夹住哨鼠尾部，取出后放入哨鼠饲养笼中，放在阳光下通风处使哨鼠体毛快速干燥；并在饲养笼上贴好标签，做好拖放地点标记和编号。

A.1.4重复测定2天。

A.1.5哨鼠运输：喂食后运回实验室饲养，运输中饲养笼取下饲水瓶，并防止运输车辆的车厢温度过高而导致哨鼠死亡。每个监测点哨鼠回收率需达到90%，饲养时的死亡率（28天内)小于10%，如死亡率高于10%需重做（以点为单位）。

附录B

（规范性）

B.1沟渠环境哨鼠监测步骤

B.1.1选择哨鼠笼作为载具，每一笼中放入10只哨鼠，用5～10m的绳绑在哨鼠笼一端。

B.1.2在投放点先进行浮力测定，将装满哨鼠的笼子放入水中，根据哨鼠是否呛水，调节好适宜的浮力后进行测定。

B.1.3在监测点上游和下游