血型鉴定抗体筛选交叉合血.ppt

目的掌握交叉配血的试验方法第29页,共37页，星期六，2024年，5月原理盐水法检查供受者之间有无ABO血型不合。用于抗体筛选阴性和不同血型骨髓移植患者的输血。第30页,共37页，星期六，2024年，5月原理凝聚胺法凝聚胺是一种高价阳离子季胺盐多聚物，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间的距离减少，能引起正常红细胞可逆性的非特异性凝集。如果是抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，则凝集不可逆。离心后，加入重悬液，凝聚胺的凝聚作用可通过加入枸橼酸钠而中和，使正常红细胞的凝聚解散，而抗体引起的凝集仍然存在。第31页,共37页，星期六，2024年，5月试剂抗A/抗B标准血清A1/B反定型细胞献血者血清或血浆以及5%红细胞悬液受检者血清或血浆以及5%红细胞悬液BASOpolymatching试剂盒标本：抗凝静脉血（EDTA-K2）第32页,共37页，星期六，2024年，5月操作步骤（盐水法）标记为主侧的试管中加入受者血清或血浆2滴和供者红细胞悬液1滴。标记为次侧的试管中加入供者血清或血浆2滴和受者红细胞悬液1滴。混匀，立即1000g离心1分钟。检查是否溶血，轻轻摇动试管检查凝集。复查献血员ABO血型，患者ABO/Rh血型。判断并记录结果。第33页,共37页，星期六，2024年，5月操作步骤（凝聚胺法）取试管2支，标记主次侧在主侧管中加入病人血清或血浆2滴，加供血者5%红细胞悬液1滴。次侧管加供血者血清或血浆2滴，加入病人5%红细胞悬液1滴。各加LIM液0.7ml，混匀，再各加polybrene(凝聚胺)溶液2滴，并混合均匀。第34页,共37页，星期六，2024年，5月操作步骤（凝聚胺法）3400rpm离心10秒，倒掉上清液，管底残留约0.1ml液体。轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重作。最后加入悬浮液（Resuspending）2滴，轻轻转动试管混合并观察结果。第35页,共37页，星期六，2024年，5月结果判读如果30秒内凝集解散，代表是凝聚胺引起的非特异性凝集，配血结果相合；如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血实验不相合。如反应可疑，可进一步倒在玻片上用显微镜观察。第36页,共37页，星期六，2024年，5月感谢大家观看第37页,共37页，星期六，2024年，5月关于血型鉴定抗体筛选交叉合血实验内容血型鉴定抗体筛选交叉配血第2页,共37页，星期六，2024年，5月血型鉴定第3页,共37页，星期六，2024年，5月目的掌握红细胞ABO血型及Rh血型鉴定第4页,共37页，星期六，2024年，5月原理ABO血型鉴定：根据红细胞上有无A抗原或（和）B抗原，以及血清中有无抗A及抗B，可以将血型分为A型、B型、AB型、O型四种，利用红细胞凝集实验通过正定型、反定型准确鉴定ABO血型。Rh血型鉴定：IgM型盐水抗D试剂能够与D阳性红细胞在盐水介质中形成肉眼可见的凝集。第5页,共37页，星期六，2024年，5月原理第6页,共37页，星期六，2024年，5月试剂抗A及抗B血清（商品试剂）5%A型和B型红细胞（试管法）10%A型和B型红细胞（玻片法）IgM型盐水抗D试剂标本抗凝静脉血EDTA-K2第7页,共37页，星期六，2024年，5月红细胞ABO血型鉴定（试管法正定型）标记两支干净的试管-A和-B在标记为-A的试管中加1滴抗A试剂。在标记为-B的试管中加1滴抗B试剂。在每个试管中各加入5%受检者红细胞悬液(1份压积红细胞+19份0.9%盐水)轻轻混匀，1000g离心1分钟。检查上清液是否有溶血。轻轻重悬细胞扣，检查凝集。第8页,共37页，星期六，2024年，5月红细胞ABO血型鉴定（试管法反定型）标记两支干净的试管Ac和Bc每管加入2滴受检者血清。在标记Ac的试管中加入1滴5%A型试剂红细胞。在标记Bc的试管中加入1滴5%B型试剂红细胞。轻轻混匀，1000g离心1分钟。检查上清有无溶血。轻轻重悬细胞扣，检查凝集。判断并记录结果。第9页,共37页，星期六，2024年，5月红细胞ABO血型鉴定（玻片法）在标记的玻板上分别加一滴抗A、抗B。各加一滴10%受检者红细胞悬液(1滴压积红细胞+9滴0.9%盐水)轻轻混匀，室温放置2-15分钟。观察并记录结果：凝集为阳性结果，不凝集为阴性