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植物花粉母细胞减数分裂制片技术和染色体观察;一、实验目的
掌握植物花粉母细胞减数分裂制片技术。熟悉减数分裂的具体过程。
;二、实验原理;减数分裂过程;在适宜的时期采集植物的花蕾,经固定液杀死固定,使细胞保持活体时形态。然后进行压片染色等处理,在显微镜下进行观察,可以看到小孢子母细胞的减数分裂过程,研究染色体在形态和数量上的动态变化特点。
;三、材料用品;四、实验方法与步骤;1.取材:
选取适当大小的花蕾,是观察花粉母细胞减数分裂的关键性步骤。不同植物取材时期不同。
玉米:抽雄前两周〔大喇叭口期〕,雄花序所在部位用刀片纵向划一切口,用镊子取出花序分枝。此时雄花序先端小穗颖长4mm左右,花药长2~3mm。
小麦:挑旗以后,旗叶抽出1-2cm,取出穗子。
时间一般在上午9时~10时,不同材料间稍有差异。;玉米大喇叭口期;小麦挑旗期;实验中注意观察:每一分枝是中上部还是下部小穗发育最早?
;2.固定:
取下的材料应立即放入固定液中杀死固定。
一般采用卡诺氏固定液,无水酒精:冰醋酸=3:1,可用95%乙醇代替无水乙醇。
如需长期保存,可先用70%酒精冲洗2次然后转入70%酒精中保存。
注意:固定液时应现配现用,固定时不要在阳光下暴晒。;3.染色和压片:;;4.镜检观察
先低倍后高倍。
具体使用参见后面显微镜的使用方法。;5.利用玉米花粉母细胞的减数分裂永久制片和照片,在显微镜下观察,并与自己的制片比较,掌握各个时期的特点。
注意:怎样区分各个时期?
如中I、中II,后II、后I?;减数分裂前期I;粗线期;前期II;;附:显微镜操作和使用;调节目镜间
距和目镜微调;本卷须知;五、作业
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