《化妆品微生物检验方法（定性） ATP生物荧光增幅法》征求意见稿.docx

11）Celsis?AdvanceII光度计。给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可，如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效的产品。

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团体标准

T/CAFFCIXXXX-XXXX

代替T/CAFFCI46-2021

化妆品微生物检验方法（定性）

ATP生物荧光增幅法

QualitativeDetectionofmicroorganismsincosmetics

AmplifiedATPbioluminescencemethod

（征求意见稿）

在提交反馈意见时，请将您知道的相关专利连同支持性文件一并附上。

XXXX-XX-XX发布

XXXX-XX-XX实施

中国香料香精化妆品工业协会???发布

ICS71.100.70

CCSY42

T/CAFFCI

T/CAFFCI

11）Celsis?AdvanceII光度计。给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可，如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效的产品。1

1

PAGE10

PAGE10

2）TAT基础培养基仅用于后续MTAT培养基和TLE培养基的配置。

3）MPiScreenTM试剂。给出这一信息是为了方便本文件的使用者，并不表示对该产品的认可，如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效的产品。

2

前??言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件代替T/CAFFCI46-2021《化妆品微生物检验方法（定性）ATP生物荧光增幅法》，与T/CAFFCI46-2021相比，除结构调整和编辑性改动外，主要技术变化如下：

——增加了“第二法双培养体系法”（见第8章）；

——更改了原产品影响测试步骤为第一法“单培养体系法”产品影响测试步骤（见第7章，2021年版的附录A）；

——调整培养基和试剂具体成分及配制方法至附录B，并增加了TLE培养基（见附录B）。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由中国香料香精化妆品工业协会提出并归口。

本文件起草单位：

本文件主要起草人：

本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为：

——2021年首次发布为T/CAFFCI46-2021；

——本次为第一次修订。

化妆品微生物检验方法（定性）ATP生物荧光增幅法

范围

本文件描述了化妆品中微生物（定性）ATP生物荧光增幅的检验方法。

本文件适用于化妆品中微生物的检验。

规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

缩略语

下列缩略语适用于本文件。

ADP二磷酸腺苷（adenosinediphosphate）

AK腺苷酸激酶（adenylatekinase）

ATP三磷酸腺苷（adenosinetriphosphate）

MTAT改良胰酪胨卵磷脂吐温肉汤（modifiedtrypticaseazolectintween）

TAT胰酪胨卵磷脂吐温肉汤（trypticaseazolectintween）

TLE吐温80-卵磷脂-正二十烷肉汤（tween80-lecithin-eicosane）

方法原理

样品稀释制成检液，经MTAT或TLE富集培养后，利用微生物体内的AK，催化外源添加的ADP底物生成ATP，实现ATP增幅；通过添加荧光素酶和荧光素，将ATP高能键在断裂过程中产生的能量转化为生物荧光信号；采用全自动荧光光度仪检测，根据生物荧光信号强度判断样品中是否含有微生物。

5仪器设备

5.1全自动荧光光度仪：需具备试剂添加、计时、读取荧光强度等功能1）。

5.2摇床培养箱：25℃±2℃、30℃±2℃、32.5℃±2℃，圆周式震荡，200r/min～250r/min。

5.3轨道式往复式摇床：振幅3.81cm，280r/min，或经验证具有同等破壁效果的摇床。

5.4生物安全柜。

5.5漩涡混合器:0r/min～2500r/min。

5.6高压灭菌器。

5.7电子天平：量程0g~200g，精确至0.1g。

5.8移液器：50μL、100μL、1mL、5mL。

5.9玻璃珠：