实验二-分光光度法测定高锰酸钾溶液的浓度标准对照法.docVIP

实验二分光光度法测定高锰酸钾溶液的浓度

实验目的

掌握分光光度计的使用。

熟悉如何寻找最大吸收波长以及吸收光谱曲线的绘制方法。

掌握标准对照法测定未知溶液浓度。

实验原理

高锰酸钾溶液呈紫红色，在可见光区具有固定的最大吸收波长位置，峰形明显。如在避光条件下保存，其峰位和峰形可长期稳定不变，可以用紫外-可见分光光度法对其进行分析与定量。相同条件下，分别配制待测溶液X和标准溶液S，并分别测定吸光度。根据郎伯-比尔定律，可写出

仪器与试剂

仪器：UV-5100型紫外可见分光光度计，分析天平，容量瓶，刻度吸管，烧杯，洗瓶，量筒，玻璃棒。

试剂：KMnO4标准溶液（125ug/mL），KMnO4样品溶液（浓度与标准溶液接近），纯化水。

操作步骤

1.KMnO4工作溶液的配制（50ug/mL）

移取125ug/mLKMnO4标准溶液标准溶液10.00mL置于25mL容量瓶中，加纯化水至刻度，混匀，备用。

2.测定KMnO4吸收光谱λmax值

在分光光度计上，以纯化水为空白管，依次按照表1选择不同的波长，比色，测得KMnO4工作溶液（50ug/mL）在不同波长下相应的吸光度A，并记录在表1中。以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收光谱曲线。在曲线上找出吸光度最大处所对应的波长，即为最大吸收波长，用λmax表示。

3.待测溶液的测定（对照法）

取KMnO4样品溶液5.00ml，置于25ml容量瓶中，用蒸馏水定容，摇匀得样品稀释液（x）。在λmax处，以蒸馏水为参比液，在完全相同的条件下测出50ug/mLKMnO4标准溶液和样品稀释液的吸光度值。

注意事项

1.吸收曲线及待测溶液的测定应在同一台仪器上进行，且测定条件相同。

2每次改变波长，必须重新调零。

3.倒溶液时远离仪器，避免溅湿仪器。

六、数据处理

1.吸收曲线的绘制

表1吸收曲线的绘制（测得λmax值）

波长λ

510

514

516

518

520

522

524

525

526

528

A

波长λ

530

532

534

536

538

540

542

544

550

560

A

?max=________________

用Excel做吸收曲线图并将图画在此处。

2.待测溶液的测定（对照法）

KMnO4样品测定液的浓度：

KMnO4样品溶液的浓度：

附1：UV-5100型紫外可见分光光度计的使用方法

1.开机，预热20分钟

2.设波长：按GOTO?键——按上下键设定所需波长——按ENTER键确认。

3.配对比色皿：

1）按MODE键，选择“T”模式；

2)将参比溶液分别倒入2个比色皿中，放入样品室；

3)将第1个比色皿拉入光路中，按ZERO键，待仪器显示“100%T”；再将第2个比色皿拉入光路中，直接读出透光率（应在99.5%-100.5%之间）；

4.调零（A=0)：按“MODE键”，选择“A”模式。将第1个装有参比溶液的比色皿拉入光路中，按ZERO键，仪器显示“0.000A”。

5.测定：将第2个比色皿中的参比溶液弃去，用待测液润洗三次，并装到约3/4高度，放入光路中，稳定后读数。

附2：比色皿的使用

比色皿的选择

测量入射光波长在350nm以上时，可选用玻璃比色皿或石英比色皿，入射光波长小于350nm为紫外光时，由于玻璃能够吸收紫外光，所以必须使用石英比色皿。比色皿有不同的光程长度，一般常用的有0.5cm、1cm、2cm、3cm规格，其中以1cm的比色皿最为常用。比色皿的光程长度决定了溶液的液层厚度。通常当待测样品溶液颜色较深时，选用光程长度较小如0.5cm、1cm光程的比色皿；当样品溶液颜色较浅时，可选光程长度较大的比色皿。比色皿的选择以所测样品溶液的吸光度A在0.3~0.7之间为宜。

比色皿的配套性检验

将待检测的比色皿都注入蒸馏水，固定入射光波长，将其中一只的透射率调至100%，测量其他各只的透射率T，其偏差小于0.5%，即可配套使用。

比色皿的使用注意事项

3.1拿取比色皿时，应拿取比色皿的磨砂面（毛面）。放入液槽架前，如比色皿的透光面有残液，可先用滤纸轻轻吸附，再用擦镜纸轻轻沿同一方向进行擦拭。

3.2比色皿内部不能黏附细小气泡，外部透光面不能留有纤维，以免影响透光率。

3.3装溶液时，先用溶液荡洗比色皿2~3次。装液高度为比色皿的3/4为宜，最多不超过4/5，以防止溶液过满溢出，污染仪器。

3.4比色皿放入液槽架，使比色皿紧靠入射光方向，先放参比溶液，再放样品溶液，透光面垂直于入射光。

3.5实验结束后，先用自来水冲洗，在用蒸馏水冲洗2~3次，之后倒置于干净的滤纸上，风干后存放于比色皿盒中。