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过量碘化物对原代培养的猪甲状腺细胞凋亡的作用

过量碘化物对原代培养的猪甲状腺细胞凋亡的作用作者：

田英娟，田园，刘超，叶亮【摘要】目的观察过量碘化物对原代培养的猪甲状腺细胞凋亡的诱导作用，并对机制作初步探讨。

方法取健康的猪甲状腺细胞培养24h后，加入不同浓度的碘化钾(KI)，观察细胞的形态改变；琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术分析细胞DNA的降解；MDA法测定细胞膜的脂质过氧化程度。

结果加入KI24h后，荧光染色镜下观察可见凋亡细胞；琼脂糖凝胶电泳呈梯状带；流式细胞术见亚二倍体（凋亡）峰，细胞凋亡率和脂质过氧化产物随碘化物浓度的升高而升高(Plt;0.05)。

结论过量碘化物诱导了原代培养的猪甲状腺细胞凋亡，可能通过活性氧机制启动凋亡。

【关键词】甲状腺细胞凋亡；过量碘；活性氧【Abstract】ObjectiveTostudytheeffectofexcessiodideontheprimaryculturedpiganditsmechnism.MethodsWeemployedtheprimaryculturedpigthyroidcells.TheapoptosiswasevaluatedbyAQ-stainedfluorescin，DNAladderbygelelectrophoresisandsubdiploidybypropidiumiodide-stainedflowcytometry.TheleveloflipidperoxideunderKItreatmentwasdeterminedbymeasuringtheproductionofthiobarbituricacidreactivesubstances.ResultsThyroidcellstreatedwithiodideexcessatdifferentconcentrationunderwentapoptosis.Iodidedisplayedadose-dependentapoptosisindexandadose-dependentgenerationofTBARSlevels.ConclusionIodideexcessinducetheapoptosisintheprimaryculturedpigthyroidcells.Thistypeofapoptosisseemstobeactivatedbyreactiveoxygenspecies.【Keywords】thyroidcellapoptosis；iodideexcess；reactiveoxygenspecies碘化物在人类的日常生活中具有重要的意义。

过量碘化物对甲状腺及培养的甲状腺细胞的毒性效应早已证实，近几十年来从凋亡角度对这种作用作了一些研究［1～3］。

目前过量碘化物对体外培养的猪甲状腺细胞的作用未见报道，其诱导甲状腺细胞凋亡的机制尚未阐明。

本实验观察过量碘化物对原代培养的猪甲状腺细胞凋亡的诱导作用，并对凋亡机制作初步研究。

1材料与方法1.1主要试剂与仪器F-12培养基为美国Gibco公司生产，促甲状腺激素(TSH)、胶原酶为美国sigma公司生产，荧光显微镜为日本OlympusBH-2型，流式细胞仪为美国BectonDickinson公司产品。

1.2甲状腺细胞培养取适量的猪甲状腺组织(锦州肉联厂提供)PBS冲洗，剪碎倒入带有磁力搅拌子的三角烧瓶中，加入双酶消化；每隔15～20min取出上2/3的消化液，漂洗制成细胞悬液；消化完毕将细胞悬液通过100目筛网过滤，调整细胞数106/ml，接种于培养板上；置5%二氧化碳孵箱，在10%FCS、1u/LTSH的F-12培养基中培养，每2～3天更换培养基。

1.3实验分组甲状腺细胞正常培养24h后，加入处理因素并分组。

空白对照组：

不加其他处理因素；阳性对照组：

放线菌酮（CHX）210-3g/L(终浓度)；阴性对照