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生物工程下游技术复习题

一、基本知识点

1、经典的蛋白质测定方法有凯氏定氮法、TCA比浊法、福林-酚法和紫外

法。

2、蛋白质分子是含有可带正电荷的氨基、亚氨基、酰氨基等和可带负电荷的

羧基、苯酚基、巯基等的两性生物大分子。

3、色谱柱是进行色谱分离的主要场所。

4、色谱，从基质材料的角度来看，可以分为有机基质和无机基质。

5、目前常见的液相色谱填料，按其物理形态，一般分为多孔型、非多孔型和

薄壳型三中结构类型。

6、等电聚焦法可以测定蛋白质的等电点，同时又能鉴定蛋白质的纯度。

7、天然人白细胞介素-2（IL-2）由133个氨基酸组成，其中有一个游离半胱

氨酸（位于第125位），而第58位和第105位的半胱氨酸形成二硫键，此二

硫键为活性所必须，而二硫键的错配对，可降低其生物活性和形成抗原性。

8、带有正电荷的蛋白质分子在电场作用下，向阴极移动。

9、径向色谱应用于生化分离，具有快速、压降低两个明显的优势。

10、羟基磷灰石晶体是骨骼和牙齿等生物体硬组织的主要无机成分，它与生

物体组织有特异的亲和力和相容性。

11、肽谱技术是指蛋白质被酶解或化学降解后肽段的分离分析和制备。

12、高速珠磨法中，影响珠磨破碎的操作参数有转速、进料速度、珠子直径

与用量、细胞浓度、冷却温度等。

13、超声破碎的效率与声频、声能、处理时间、细胞浓度及菌种类型等因素

有关。

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14、空化现象是在强声波作用下，让气泡形成，胀大和破碎的现象。

15、切向流过滤又称错流过滤、交叉流过滤、十字流过滤，（cross-flow

filtration）就是一种维持恒压下高过滤速度的技术。

16、离子交换法按照其操作方式可以分为间隙式分批操作及柱式洗脱两种。

17、在膜分离过程中，浓差极化与膜污染是经常发生存在的两种现象，也是

影响膜分离技术在某些方面应用的拦路虎。

18、泡沫分离技术是一种基于溶液中溶质（或颗粒）间表面活性的差异进行

分离的一种方法，表面活性强的物质优先吸附于分散相（气体）与连续相（液

面）的界面处，被气泡带出连续相而达到浓缩。

19、膜分离技术具有设备简单、操作方便、无相变、无化学变化、处理效率

高和节省能量等优点，已作为一种单元操作日益受到人们极大重视。

20、可依在分离时一次进样量的多少，将色谱分为分析色谱（10mg）、中等规

模制备色谱亦即半制备色谱（10-50mg）、制备色谱（0.1-1g）和工业生产规

模色谱（大于20g/d）4大类。

21、离子交换色谱，按所使用的离子交换剂可分为，强阴离子、强阳离子、

弱阴离子、弱阳离子交换方式。

22、在色谱单元纯化条件的最优化中，首先解决的问题是要对所用的色谱柱

的种类进行选择，这取决于试样和目标产物的性质。一般来说，期望目标产

品尽可能多的保留，而杂蛋白不保留，因此需选择目标产品与固定相作用力

强、廉价的色谱柱。

23、色谱和电泳是目前所知最好的两种分离方法。其理论塔板数可达百万数

量级。

24、基质材料（或称载体）是色谱填料的支撑骨架，它直接决定了填料的颗

粒大小与分布、颗粒强度、孔径大小与分布、孔结构形态、颗粒内部的化学

结构与其稳定性等，也直接影响到对颗粒表面（包括内孔表面）化学修饰方

法的实施。

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25、基质包括细胞生长所需各种营养成分，其消耗主要有三个方面：一是细

胞的生长，合成新的细胞；二是细胞维持生命要消耗能源物质；三是合成次

级代谢产物。

26、径向色谱：是采用了径向流动技术，样品和流动相沿径向流动，而不是

如传统色谱柱（既轴向色谱）样品和流动相是从柱的一段流向另一端。流动

相和样品可以从色谱柱的周围流向柱圆心，也可以是从色谱柱圆心流向柱的

周围的一种色谱技术。

27、全交换容量：指每克干介质或每毫升湿介质具有的功能基的含量。

28、工作容量：也称有效容量，是指每克干介质或每毫升湿介质在一定操作

条件下交换吸附蛋白质的实际容量。

29、有效柱长：溶质从开始迁移至其迁移速度等于流动相速度时，溶质在色

谱柱上迁移的距离成为有效迁移距离，也成为有效柱长。

30、最短柱长：混合溶质中使一对最难分离的溶质1和溶质2的分离度Rs=1

时所需的最短长度。

31、氨基酸分析可以分为柱后反应法和柱前衍生法两大类。

32、柱的填充目前