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TCID50和PFU的换算公式--第1页

1、PFU:plaqueformingunit，空斑形成单位：感染性滴度的单位一般表示为PFU/ml。由

于测定pfu往往重复性较差，因此近些年许多研究又开始采用TCID50方法来计算病毒的感

染单位。因此建议也可使用TCID50法。

2、MOI:multiplicityofinfection，感染复数：传统的MOI概念起源于噬菌体感染细菌的

研究。其含义是感染时噬菌体与细菌的数量比值，也就是平均每个细菌感染噬菌体的数量。

噬菌体的数量单位为pfu。一般认为MOI是一个比值，没有单位，其实其隐含的单位是pfu

number/cell。后来MOI被普遍用于病毒感染细胞的研究中，含义是感染时病毒与细胞数量

的比值。

然而，由于病毒的数量单位有不同的表示方式，从而使MOI产生了不同的含义。能产生

细胞裂解效应的病毒例如单纯疱疹病毒等习惯上仍用pfu表示病毒数量，因此其MOI的含

义与传统的概念相同。传统意义上的MOI的测定，其原理是基于病毒感染细胞是一种随机

事件，遵循Poisson分布规律，可计算出感染一定比例的培养细胞所需的感染复数（MOI）。

其公式为：

P=1-P(0),P(0)=e-m或m=-InP（0）。

其中：

P为被感染细胞的百分率

P(0)为未被感染细胞的百分率

m为MOI值

例如，如果要感染培养皿中99%的培养细胞，则：

P(0)=1%=0.01

m=-In(0.01)=4.6pfu/cell。

(一)原理病毒感染细胞后，由于固体介质的限制，释放的病毒只能由最初感染的细胞向

周边扩展。经过几个增殖周期，便形成一个局限性病变细胞区，此即病毒蚀斑。从理

论上讲，一个蚀斑是由最初感染细胞的一个病毒颗粒形成的，因而该项技术常用于病

毒颗粒计数和分离病毒克隆。但在实际操作中，常出现几个病毒颗粒同时感染一个细

胞的情况，影响滴定的准确性和克隆的纯一性，为此，接种的病毒液要充分分散和稀

释。对于细胞结合性病毒，如MDV，需用单层细胞；对细胞释放性病毒，即可用固相

介质悬浮的细胞，也可用单层细胞，但后者需用琼脂等固体介质盖在细胞上，以防释

放的病毒在液体介质中流动。固体介质的浓度由病毒的大小而定，大病毒用浓度较低

的介质，小病毒用浓度较高的介质，以便将蚀斑的生长速度控制在适宜的范围内。小

蚀斑需用显微镜观察，1-10mm的大蚀斑可用肉眼计数。为便于肉眼观察，常用中性红

等染料染色。因病变细胞不吸收中性红，病变细胞区便呈现无色蚀斑。病毒悬液的滴

度以每毫升蚀斑形成单位(PFU/ml)来表示。例如，3个细胞瓶的平均蚀斑是58，接种量

335

为0.2ml，病毒的稀释度为2.5×10，则病毒原液的滴度为：58÷0.2×2.5×＝107.25×10

(PFU/ml)

PFUs＝0.7×TCID50的滴度

(二)技术应用蚀斑技术可以应用于分离病毒的克隆(无性繁殖纯系)、病毒或血清的滴

定，也可用蚀斑形态和大小研究病毒的生物学特性。

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1.病毒生物学纯化(Virusbiologicalpurification)在进行血清中和试验时,常常会出现标

准病毒株的滴度下降，因而影响了试验的准确性,这种情况多见于虫煤病毒。这可能是