DNA的生物合成课件.pptx

DNA的生物合成

(複製)

DNABiosynthesis(Replication);

DNA的生物合成

複製(replication)：

以母鏈DNA為範本合成子鏈DNA的過程。;本章主要內容：

?複製的基本規律

?DNA複製的酶學和拓撲學變化

?複製的過程

?逆轉錄和其他複製方式

?DNA損傷(突變)與修復

;複製的基本規律

BasicRulesofDNAReplication;半保留複製(semi-conservativereplication)

雙向複製(bidirectionalreplication)

半不連續複製(semi-discontinuousreplication)

方向性和高保真性;一、半保留複製的實驗依據和意義;全保留式半保留式混合式;DNA半保留複製實驗;按半保留複製方式，子代DNA與親代DNA的堿基序列一致，即子代保留了親代的全部遺傳資訊，體現了遺傳的保守性。;原核生物：?基因組是環狀DNA

?只有一個複製起始點

複製時，DNA從起始點(origin)向兩個方向解鏈，形成兩個延伸相反的複製叉，稱為雙向複製。;複製時雙鏈打開，分開成兩股，各自作為範本，子鏈沿範本延長所形成的Y字形的結構稱為複製叉(replicationfork)。;在原核生物雙向複製中，DNA被描述為眼睛狀。為說明方便而做的圖為?形。;;真核生物：

?染色體DNA有多個複製起始點。

?兩個起始點之間的DNA片段稱為複製子(replicon)。

?複製子是獨立完成複製的功能單位。;真核生物多個複製起始點、複製子與複製叉;真核生物的多複製子複製電鏡圖;;順著解鏈方向生成的子鏈，複製是連續進行的這股鏈稱為領頭鏈。

另一股鏈因為複製的方向與解鏈方向相反，不能順著解鏈方向連續延長，這股不連續複製的鏈稱為隨從鏈。

領頭鏈連續複製而隨從鏈不連續複製，就是複製的半不連續性。;岡崎片段：

?1968年日本生化學者岡崎用電鏡及放射自顯影技術，觀察到DNA複製中出現一些不連續的片段，將這些不連續的片段稱為岡崎片段。

?原核生物:1000~2000個核苷酸

?真核生物:100~200個核苷酸;半不連續複製動畫;DNA複製的酶學

TheEnzymologyofDNAReplication;DNA複製的體系

底物:dNTP(dATP、dGTP、dCTP、dTTP)

聚合酶:依賴DNA的DNA聚合酶(DNA-pol)

範本:解開成單鏈的DNA母鏈

引物:提供3-OH末端的寡核苷酸

其他酶和蛋白質因數:拓撲異構酶、解螺旋酶、單鏈DNA結合蛋白、引物酶、連接酶;一、複製的化學反應;聚合反應的特點;二、DNA聚合酶;1959年獲諾貝爾生理學或醫學獎;;聚合反應的特點

?以單鏈DNA為範本

?以dNTP為原料

?引物提供3-OH

?聚合方向為5→3

?遵守堿基互補規律

;;（一）原核生物的DNA聚合酶

?DNA-polⅠ

?DNA-polⅡ

?DNA-polⅢ

?DNA-polⅣ

?DNA-polⅤ;催化DNA聚合;功能：校讀，去除RNA引物，填補空隙，參與DNA損傷修復。;323個氨基酸;DNA聚合酶II(DNA-polII)

?具有5′→3′的聚合酶活性。

?只是在無polⅠ及polⅢ的情況下暫時

起作用。

?對範本的特異性不高,參與DNA損傷

的應急狀態修復。;DNA聚合酶III(DNA-polIII)

是複製延長中真正起催化作用的酶。

由10種亞基組成不對稱的聚合體。

α，ε，θ亞基組成核心酶，α亞基具有5→3的聚合活性，ε亞基具有3→5外切酶活