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**DeterminingtheCauseofRetentionChangesonthesameColumn
同一柱上保留时间改变原因的确定1.DetermineK′,?,andtrforsuspectpeaks对怀疑峰K′,?和tr的确定2.Washcolumn冲洗柱子3.Testnewcolumn-notelotnumber试验新柱-记录一批数据4.Reviewcolumnequilibrationprocedures观察柱平衡过程5.Makeupfreshmobilephase4andtest配制新鲜流动相再试验6.Checkinstrumentperformance检查仪器性能第31页,共35页,星期六,2024年,5月**ChangeinRetention/SelectivityColumn-toColumn
柱与柱之间保留时间/选择性的改变Differentcolumnhistories(aging)不同的柱历史(老化)Insufficient/inconsistentequilibration平衡不够/不一致Poorcolumn/mobilephasecombination柱/流动相差Changeinmobilephase流动相改变Changeinflowrate流速改变Otherinstrumentissues其他仪器问题Slightchangesincolumnbedvolume(tronly)柱内体积轻微改变第32页,共35页,星期六,2024年,5月**Lot-to-LotSelectivityChange(pH)
批与批之间选择性改变(pH)pH4.5-Lot1pH3.0-Lot1pH4.5-Lot2pH3.0-Lot2pH4.5showsselectivitychangefromlot-to-lotforbasiccompoundspH4.5显示批与批之间对碱性化合物的选择性改变pH3.0showsnoselectivitychangefromlot-to-lot,indicatingsilanolsensitivityatpH4.5pH3.0显示批与批之间对碱性化合物的无选择性改变,表明在pH4.5硅醇基的灵敏性第33页,共35页,星期六,2024年,5月**Conclusions结论HPLCcolumnproblemareevidentas:高效液相色谱柱问题明显的为:Highpressure高压Undesirablepeakshape不希望得到的峰形Changesinretention/selectivity保留时间/选择性的改变Oftentheseproblemsarenotassociatedwiththecolumnandmaybecausedbyinstrumentandexperimentalconditionissues.经常遇到的这些问题不一定与柱有关,而与仪器和实验条件方面的问题有关第34页,共35页,星期六,2024年,5月*感谢大家观看第35页,共35页,星期六,2024年,5月**关于色谱柱和色谱系统故障****HPLCComponents
HPLC的组成Pump泵Injector/Autosampler进样器/自动进样器Column色谱柱Detector检测器DataSystem/Integrator数据系统/积分仪表Allofthesecomponentscanhaveproblemsandrequiretroubleshooting.所有这些部件可能出现故障而需要检修。
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