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高效毛细管电泳;12.1基本概念

电泳：一个“自由”带电粒子在一定介质中在电场作用下的迁移

淌度：μep表述物质电泳特性的参数，与粒子电荷、质量、半径、介质等有关;电渗：μeo由于粘滞阻力的存在，离子的电泳会带动溶剂同向运动。正负离子当量数相同时，溶剂受到大小相等方向相反的作用力，因此通常观测不到溶剂的运动。若设法使某种离子不运动，则作用于溶剂的力便失去了平衡，溶剂发生单向流动，这种流动称电渗。

;在不考虑相互作用的前提下，粒子在毛细管介质中的运动速度是泳流速度和渗流速度的矢量和。一般情况下，电渗流速度是电泳流速度的5-7倍，混合物中所有的组份随电渗流朝一个方向迁移。

式中E：场强

μeo电泳淌度

μep电渗淌度;12.2原理

电渗流方向：高电位低电位

正溶质离子所受的力：电场力+电渗力

负溶质离子所受的力：电场力?电渗力

中性分子所受的力：电渗力

柱效：N＝5.54（tR/W1/2)2tR、W1/2取同一单位;溶质迁移方向由电场力和电渗力的矢量和决定，一般来说，溶质迁移方向与电渗流同。

流出顺序：①正离子②中性粒子③负离子;

;12.3高效毛细管电泳仪器装置图;12.3.1高压电源

0--30KV输出，恒压恒流，正负极性可调。Pt丝为电极?

12.3.2进样系统

A、重力（高度差）进样

B、负压进样

C、电渗法进样?

12.3.3分离系统

毛细管：I.D.：50?m-75?m，长30-100cm;12.3.4检测系统

商品仪器：UV-VIS，加石英聚焦镜；激光荧光

实验室：质谱，电分析

?

12.3.5清洗系统

一般用负压法，NaOH洗液，减少吸附，清洗对重现性影响重大;12.4分类

常规区带电泳（CZE）

胶束电动毛细管色谱（MECC）

毛细管离子分析;12.4.1常规区带电泳（CZE）

电解质缓冲液，正高压

分离阳离子和大分子阴离子

12.4.2胶束电动毛细管色谱（MECC）

揉合了毛细管电泳和液相分配色谱的原理，将表面活性剂加到电解液中，溶质分子进入体系后在胶束相和水相之间进行分配，不同的溶质分子因电泳速度和分配系数的不同而分离。;主要用于分离中性分子，正高压

MECC体系存在着类似???色谱的两相，一是流动的水相，另一相是移动的“固定相”--—胶束相，溶质在这两相之间分配。

表面活性剂的浓度足够大时，单体结合在一起，形成一个球体，称为胶束，这个足够大的浓度称为临界浓度。;;12.5应用及前景

特点：

A、分离效率高：?104理论塔板数，接近GC

B、分离速度快：优于LC，接近GC

C、进样量少：nL

D、可分离GC受限制的物质;应用：

A、药物分析：旋光异构体

B、生化分析：氨基酸衍生物、蛋白、DNA

C、环境分析：PAH、阴离子、酚

?

弱点：

检测器的绝对灵敏度高，但浓度灵敏度仅为ppm;发展趋势：

A、检测器的创新

B、预浓缩富集技术：利用电泳原理富集阴阳离子；C18等吸附剂在线应用

C、移植成熟的液相色谱技术于毛细管电泳中;高效毛细管电泳

HighPerformanceCapillaryElectrophoresis;12.3基本概念

电泳：一个“自由”的带电粒子在一定介质中在电场作用下的迁移。

淌度，μep：表述物质电泳特性的参数，与粒子电荷、质量、半径、介质等有关。;电渗，μeo：

由于粘滞阻力的存在，离子的电泳会带动溶剂同向运动。正负离子当量数相同时，溶剂受到大小相等方向相反的作用力，因此通常观测不到溶剂的运动。若设法使某种离子不运动，则作用于溶剂的力便失去了平衡，溶剂发生单向流动，这种流动称电渗。

;在不考虑相互作用的前提下，粒子在毛细管介质中的运动速度是泳流速度和渗流速度的矢量和。一般情况下，电渗流速度是电泳流速度的5-7倍，混合物中所有的组份随电渗流朝一个方向迁移。

式中E：场强

μeo电渗淌度

μep电泳淌度;12.2原理

电渗流方向：高电位低电位

正溶质离子所受的力：电场力+电渗力

负溶质离子所受的力：电场力?电渗力

中性分子所受的力：电渗力

溶质迁移方向由电场力和电渗力的矢量和决定，一般来说，溶质迁移方向与电渗流同。

流出顺序：①正离子②中性粒子③负离子;

;12.3高效毛细管电泳仪器

装置图;12.3.1高压电源

0-30KV输出，恒压恒流，正负极性可调。Pt丝电极?

12.3.2进样系统

A、重力（高度差）进样

B、负压进样

C、电渗法进样?

12.3.3分离系统

毛细管：I.D.50?m-75?m，长30-100cm;12.3.4检测系统

商