生物工程 酶工程2.pptVIP

三、生物传感器的分类1、酶传感器(EnzymeSensor)测定项目酶固定化方法使用电极稳定性／天测定范围（mg/ml）葡萄糖葡萄糖氧化酶共价氧电极1001～5×102胆固醇胆固醇酯酶共价铂电极3010～5×103青霉素青霉素酶包埋PH电极7～1410～1×103尿素尿素酶交联铵离子电极6010～1×103磷脂磷脂酶共价铂电极30102～5×103乙醇乙醇氧化酶交联氧电极12010～5×103尿酸尿酸酶交联氧电极12010～1×103L一谷氨酸谷氨酸脱氨酶吸附铵离子电极210～1×104L一谷酰胺谷酰胺酶吸附铵离子电极210～1×104L一酪氨酸L一酪氨酸脱羧酶吸附二氧化碳电极2010～1×104它将活性物质酶覆盖在电极表面,酶与被测的有机物或无机物反应,形成一种能被电极响应的物质。例如,脲在尿素酶催化下发生反应1967年Updick和Hicks将固定化的葡萄糖氧化酶膜结合在氧电极上,做成了第一支葡萄糖电极；此后,这类酶传感器通常是通过检测产物H2O2的浓度变化或氧的消耗量来检测底物。优点：酶易被分离，贮存较稳定，所以目前被广泛的应用。缺点：1.酶的特异性不高，如它不能区分结构上稍有差异的梭曼与沙林。2.酶在测试的过程中因被消耗而需要不断的更换。酶传感器的特点：微生物传感器分为两类：一类是利用微生物在同化底物时消耗氧的呼吸作用；另一类是利用不同的微生物含有不同的酶。好氧微生物在繁殖时需消耗大量的氧,可以氧浓度的变化来观察微生物与底物的反应情况。2、微生物传感器(MicroorganismSensor)例如,荧光假单胞菌,能同化葡萄糖；芸苔丝孢酵母可同化乙醇,因此可分别用来制备葡萄糖和乙醇传感器，这两种细菌在同化底物时,均消耗溶液中的氧,因此可用氧电极来测定基于不同类型的信号转换器,常见的微生物传感器有电化学型、光学型、热敏电阻型、压电高频阻抗型和燃料电池型，测定项目微生物测定电极检测范围（mg/L）葡萄糖荧光假单胞菌O25～200乙醇芸苔丝孢酵母O25～300亚硝酸盐硝化菌O251～200维生素B12大肠杆菌O2?谷氨酸大肠杆菌CO28～800赖氨酸大肠杆菌CO210～100维生素B1发酵乳杆菌燃料电池0.01～10甲酸梭状芽胞杆菌燃料电池1～300头孢菌素费式柠檬酸细菌pH?烟酸阿拉伯糖乳杆菌pH?3.免疫传感器实时监测传感器表面的抗原-抗体反应。抗体（antibody）抗体是一种免疫球蛋白．免疫球蛋白有5种，分别命名为IgG，IgA，IgM，IgD和IgE.无脊椎动物不产生免疫球蛋白．鱼有IgM,两栖类有IgM和IgG.除人类有5种免疫球蛋白外，大多数哺乳动物只有IgG，IgA,IgM和IgE四种免疫球蛋白．抗原（antigen）抗原是一种进入机体后能刺激机体产生免疫反应的物质．它可能是生物体(如各种微生物),也可能是非生物体(如各种异类蛋白、多糖等).通常，分子量大于10000，而且具有一定结构（如苯环或杂环等结构）的物质均可成为抗原性物质，都能有效地诱发产生抗体．抗体对相应的抗原具有识别和结合的双重功能,在与抗原结合时,选择性强,灵敏度高，免疫传感器就是利用其双重功能将抗体或抗原和换能器组合而成的装置。由于蛋白质分子(抗体或抗原)携带有大量电荷、发色基团等,当抗原抗体结合时,会产生电学、化学、光学等变化,通过适当的传感器可检测这些参数,从而构成不同的免疫传感器，总的来说可分为两类:(1)非标记型;(2)标记型如黄曲霉毒素传感器,它由氧电极和黄曲霉毒素抗体膜组成,加到待测样品中,酶标记的及未标记的黄曲霉毒素便会与膜上的黄曲霉毒素抗体发生竞争反应,测定酶标黄曲霉毒素与抗体的结合率,便可知样品中的含量根据使用的信号转换器,有电化学免疫传感器、光学免疫传感器、压电免疫传感器及表面等离子体共振(SPR)型传感器。依据生物体内核苷酸顺序相对稳定,核苷酸碱基顺序互补的原理而设计出核酸探针传感器,即基因传感器。基因传感器一般有10~30个核苷酸的单链核酸分子,能够专一地与特定靶序列进行杂交从而检测出特定的目标核酸分子。根据换能器种类不同可分为电化学型、光学型、压电免疫传