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目次
前言 ii
1适用范围 1
2规范性引用文件 1
3术语和定义 1
4方法原理 1
5干扰和消除 2
6试剂和材料 2
7仪器和设备 3
8样品 3
9分析步骤 4
10结果计算与表示 5
11精密度和准确度 6
12质量保证和质量控制 6
13废物处理 7
附录A(资料性附录)最大可能数(MPN)表 8
附录B(资料性附录)粪大肠菌群检验记录及报告推荐格式 12
前言
为贯彻《中华人民共和国环境保护法》和《中华人民共和国水污染防治法》,保护生态环境,保障人体健康,规范水中粪大肠菌群的测定方法,制定本标准。
本标准规定了测定地表水、地下水、生活污水和工业废水中粪大肠菌群的多管发酵法。
本标准是对《水质粪大肠菌群的测定多管发酵法和滤膜法(试行)》(HJ/T347-2007)多管发酵法部分的修订。
本标准首次发布于2007年,原起草单位为中国环境监测总站。本次为第一次修订。
本次修订的主要内容如下:
——完善了方法原理的表述;
——增加了12管法和15管法的检出限;
——分析步骤中增加了12管法,完善了样品稀释方法;
曾加了规范性引用文件、术语和定义、干扰和消除、仪器和设备、样品采集、样品保存、精密度和准确度、质量保证和质量控制、废物处理等章节;
——将MPN表移至附录中。
自本标准实施之日起,《水质粪大肠菌群的测定多管发酵法和滤膜法(试行)》
(HJ/T347-2007)废止。
本标准的附录A和附录B为资料性附录。
本标准由生态环境部生态环境监测司、法规与标准司组织制订。本标准起草单位:辽宁省环境监测实验中心。
本标准验证单位:大连市环境监测中心、丹东市环境监测中心站、锦州市环境监测中心站、辽阳市环境监测站、沈阳市疾病预防控制中心和辽宁北方环境检测技术有限公司。
本标准生态环境部2018年12月26日批准。
本标准自2019年6月1日起实施。本标准由生态环境部解释。
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水质粪大肠菌群的测定多管发酵法
1适用范围
本标准规定了测定水中粪大肠菌群的多管发酵法。
本标准适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中粪大肠菌群的测定。本方法的检出限:12管法为3MPN/L;15管法为20MPN/L。
2规范性引用文件
本标准引用了下列文件或其中的条款。凡是不注日期的引用文件,其有效版本适用于本
标准。
GB/T14581水质湖泊和水库采样技术指导HJ494水质采样技术指导
HJ/T91地表水和污水监测技术规范
3术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。3.1
粪大肠菌群fecalCoIiforms
又称耐热大肠菌群(thermotolerantcoliforms)。44.5℃培养24h,能发酵乳糖产酸产气
的需氧及兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌。
3.2
最大可能数mostprobablenumber(MPN)
又称稀释培养计数,是一种基于泊松分布的间接计数法。利用统计学原理,根据一定体积不同稀释度样品经培养后产生的目标微生物阳性数,查表估算一定体积样品中目标微生物存在的数量(单位体积存在目标微生物的最大可能数)。
4方法原理
将样品加入含乳糖蛋白陈培养基的试管中,37℃初发酵富集培养,大肠菌群在培养基中生长繁殖分解乳糖产酸产气,产生的酸使溴甲酚紫指示剂由紫色变为黄色,产生的气体进入倒管中,指示产气。44.5℃复发酵培养,培养基中的胆盐三号可抑制革兰氏阳性菌的生长,最后产气的细菌确定为是粪大肠菌群。通过查MPN表,得出粪大肠菌群浓度值。
2
5干扰和消除
5.1活性氯具有氧化性,能破坏微生物细胞内的酶活性,导致细胞死亡,可在样品采集(8.1)时加入硫代硫酸钠溶液(6.7)消除干扰。
5.2重金属离子具有细胞毒性,能破坏微生物细胞内的酶活性,导致细胞死亡,可在样品采集(8.1)时加入乙二胺四乙酸二钠溶液(6.8)消除干扰。
6试剂和材料
除非另有说明,分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂或生物试剂,实验用水为蒸馏水或去离子水。
6.1
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