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实验十细菌的生理生化反应
;一、??目的;二、??原理;四、步骤;(一)????糖类发酵试验;与对照管比较,若接种培养液保持原有颜色,其反应结果为阴性,表明该菌不能利用该种糖,记录用“-”表示;如培养液呈黄色,反应结果为阳性,表明该菌能分解该种糖产酸,记录用“+”表示。
培养液中的杜氏小管内有气泡为阳性反应,表明该菌分解糖能产酸并产气,记录用“+”表示;如杜氏小管内没有气泡为阴性反应,记录用“-”表示。
;(二)?乙酰甲基甲醇试验(V.P试验)
?原理
某些细菌在葡萄糖蛋白胨水培养液中能分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸缩合,脱羧成乙酰甲基甲醇,后者在强碱环境下,被空气中氧氧化为二乙酰,二乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色化合物,称V.P(+)反应。
?材料
菌种:大肠杆菌(Escherichia?coli)、
产气肠杆菌(Enterobacter?aerogenes)
?培养基:葡萄糖蛋白胨水培养液
步骤
1??标记试管:取2支装有葡萄糖蛋白胨培养液的试管,分别标记大肠杆菌、产气肠杆菌。
2??接种培养:以无菌操作分别接种少量菌苔至以上相应试管中。置37℃恒温箱中,培养24~48h。;(三)?甲基红试验(M.R.试验);(四)吲哚试验;(五)柠檬酸盐试验;结果观察;(六)硫化氢试验;结果观察;(七)淀粉水解试验;结果观察;六实验结果与分析;2灌装试管;3灭菌(集体进行)
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