细胞衰老与凋亡 (3).ppt

Caspase引起线粒体PT（Permeabilitytransition）孔打开，导致线粒体的跨膜电位下降；细胞色素C被释放到胞质中、激活Caspase-9，后者再激活Caspase-3。Bcl-2，Bcl-xl均作用于线粒体。线粒体在CD95诱导的凋亡中的作用第32页,共38页，星期六，2024年，5月细胞色素释放引起的凋亡。R.ChrisBleackleyandJeffreyA.Heibein2001?第33页,共38页，星期六，2024年，5月凋亡信号通路当细胞接受凋亡信号分子(Fas,TNF等)后，凋亡细胞表面信号分子受体相互聚集并与细胞内的衔接蛋白(Adaptorprotein)结合，这些衔接蛋白又募集Procaspases聚集在受体部位，Procaspase相互活化并产生级联反应，使下游caspases活化，细胞凋亡。下游Caspases活化后，作用底物：裂解核纤层蛋白，导致细胞核形成凋亡小体，裂解DNase结合蛋白，使DNase释放，降解DNA并形成DNALadder。裂解参与细胞连接或附着的骨架和其他蛋白，使凋亡细胞皱缩、脱落，便于细胞吞噬；导致膜脂PS重排，便于吞噬细胞识别并吞噬。第34页,共38页，星期六，2024年，5月物理性因子：包括射线（紫外线，?射线等），较温和的温度刺激（如热激，冷激）等。化学及生物因子：包括活性氧基团和分子，DNA和蛋白质合成的抑制剂，激素，细胞生长因子，肿瘤坏死因子?（TNF?），抗Fas/Apo-1/CD95抗体等。三、细胞凋亡诱导因子及检测(一)诱导因子第35页,共38页，星期六，2024年，5月形态学观测：染色法、透射和扫描电镜观察；DNA电泳：DNA片段就呈现出梯状条带；TUNEL(TerminaldeoxynucleotidylTransferaseBiotin-dUTPNickEndLabeling)测定法，即DNA断裂的原位末端标记法；彗星电泳法（cometassay）/单细胞凝胶电泳法（SingleCellGelAssay）；流式细胞分析根据凋亡细胞DNA断裂和丢失，采用碘化丙啶使DNA产生激发荧光，用流式细胞仪检出凋亡的亚二倍体细胞，同时又能观察细胞的周期状态。(二)细胞凋亡的检测第36页,共38页，星期六，2024年，5月彗星电泳第37页,共38页，星期六，2024年，5月感谢大家观看第38页,共38页，星期六，2024年，5月**诺关于细胞衰老与凋亡(3)第一节细胞的衰老又称老化，指细胞随着年龄的增加，机能和结构发生退行性变化，趋向死亡的不可逆的现象。衰老和死亡是生命的基本现象，衰老过程发生在生物界的整体水平、种群水平、个体水平、细胞水平以及分子水平等不同的层次。第十三章细胞衰老与凋亡第2页,共38页，星期六，2024年，5月更新组织：如上皮细胞、血细胞。构成更新组织的细胞可分为３类：①干细胞、②过渡细胞、③成熟细胞。稳定组织：可补偿性增生，如：肝、肾细胞。恒久组织：细胞不再分裂，如神经、骨骼、心肌细胞。可耗尽组织：如人类的卵巢实质细胞。一、人体细胞的动态分类第3页,共38页，星期六，2024年，5月二、细胞衰老的特征

（一）形态变化第4页,共38页，星期六，2024年，5月DNA：复制与转录受阻，端粒DNA、mtDNA缺失。DNA氧化、断裂、缺失和交联，甲基化程度降低。RNA：含量降低。蛋白质：含成下降，发生修饰、交联。酶分子：活性中心被氧化，金属离子丢失，酶分子的二级结构，溶解度，等电点发生改变，酶失活。脂类：不饱和脂肪酸被氧化。（二）分子水平的变化第5页,共38页，星期六，2024年，5月1、代谢废物积累：如：脂褐质2、自由基攻击：导致DNA、蛋白质变异，正常细胞内存在清除自由基的防御系统：酶系统：超氧化物歧化酶(SOD)，过氧化氢酶(CAT)，谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)；非酶系统：维生素E，醌类等电子受体。三、细胞衰老的分子机理（一）差错学派第6页,共38页，星期六，2024年，5月1、细胞有限分裂学说“Hayflick”界限，即细胞最大分裂次数。L.Hayflick(1961)报道，人的成纤维细胞在体外培养时增殖次数是有限的（60~70代）。细胞增殖次数与端粒DNA长度有关。（二）遗传论学派第7页,共38页，星期六，2024年，5月关于细胞增殖能力和寿命是有限的观点。细胞，至少是培养的二倍体细胞，不是不死的，而是有一定的寿命；它们的增殖能力不是无限的，而是有一定的界限，这就是Hayflick界限。Hayflick界限：