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B41
备案号：10512
内蒙古自治区地方标准
DB15/T332一－2000
用酶联免疫吸附实验检测猪瘟
免疫抗体技术规程
if~chnicalStandardsbymeansofEnzyme-LinkedImmunosorbentAssayforthe
DetectionofSwineFeverImmuneAntibody
2000-04-15实施
内蒙古自治区质量技术监督局发布／卢
~JB15/T332-2000
前
用酶联免疫吸附试验CELlSA）检测猪瘟血清抗体，制定出科学合理的免疫程序，达到有效防制猪
瘟目的，制定本规程。
本标准附录A、附录B是标准的附录。
本标准附录C是提示的附录。
本标准由内蒙古自治区畜牧厅提出。
本标准起草单位：内蒙古自治区兽医卫生监督检验所。
本标准主要起草人：李润清、赵林立、王旭红、杨冬梅、刘志刚。
II
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内蒙古自治区地方标准
用酶联检疫吸附实验检测猪瘟
免疫抗体技术规程
DB15/T332一－2000
TechnicalStandardsbymeansofEn马rme-LinkedImmunosorbentAssay
fortheDetectionofSwineFeverImmuneAntibody
范围
本规程规定了猪瘟免疫抗体检测技术及操作方法。
本规程检测对象为内蒙古自治区境内饲养的生猪。
本规程适用于内蒙古自治区猪瘟免疫抗体检测。
抽样方法：
根据具体情况，合理确定抽样范围，每群抽样5%～20%。认真填写抽样送检单，格式见附录B（标
准的附录）。
检测样品：无菌采集猪血，分离血清，检验所需血清约0.5～lml，血清在冰冻状态下保存和送
操作方法［试剂配制见附录AC标准的附录）］
1用包被液将猪瘟抗原作100倍稀释后加入ELISA板孔中，每孔加100µ1，置湿盒于4℃过夜。
弃去孔内液体，用洗涤液冲洗板3次，拍干0
.3用血清稀释液将待检血清作100倍稀释，每孔加100µ1。同时，设猪瘟阳性、阴性血清对
37℃培育1小时。
重复2.3.2操作二次。
用血清稀释液将免抗猪IgG一辣根过氧化物酶结合物作100倍稀释，每孔加入100µl,37℃培
每孔加入底物溶液100µ1，室温下避光显色30分钟。
f每孔力日入终止液50µ1，于酶标仪中测定492nm波长的光密度值COD值）。
判定标准
∞值＞o.2为猪瘟免疫抗体阳性。
首（自治区质量技术监督局2000-02-14批准
2000-04一15实施
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f手2
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