感染管理环境卫生学采样及检查方法.doc

感染管理环境卫生学采样及消毒灭菌效果监测SOP

根据《消毒技术规范(2002年版)》GB15979-2002、《医院消毒卫生标准》GB15982—1995及《内镜清洗消毒技术操作规范（2004年版）》等规定，特制定兰大一院环境卫生学采样及消毒灭菌效果监测SOP。

一、空气消毒效果的监测

1.1采样时间:在消毒处理后或进行医疗活动之前采样。采样高度：距地面垂直高度80～150cm

1.2采样方法：

A:非层流房间

(1)布点方法:室内面积≤30m2，设内、中、外对角线布3点，内、外点布点部位距墙壁1m处；室内面积＞30m2，设4角及中央5点，4角的布点部位距墙壁1m处。

(2)采样方法:将普通营养琼脂平板(直径为9cm)放在室内各采样点处，采样高度为距地面1.5m采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露5min，盖好立即送检。

B：层流房间

层流房间应在空态或静态条件下采样，根据房间不同净化级别进行布点，操作按照GB50333-2002,9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露30min后送检培养。

1.3检测方法:细菌菌落总数检查：将已采样完毕的培养皿在6h内送进实验室，置于37度温箱内培养48h后，计算菌落总数，

1.4计算结果：

非层流房间：按照公式计算：细菌总数（cfu/m3）=50000N/（A×T）＝菌落数×157

式中A为平板面积（cm2）；T为平板暴露时间（min）；N为平均菌落数（cfu）。层流房间直接以个/30min.90mm皿为单位计算结果

1.5结果判定

非层流房间：

Ⅰ类区域：细菌总数≤10cfu/m3(或0.2cfu/平板)，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格；

Ⅱ类区域：细菌总数≤200cfu/m3(或4cfu/平板)，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格；

Ⅲ类区域：细菌总数≤500cfu/m3(或10cfu/平板)，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格。

层流房间：按照GB50333-2002要求判定

二、物品和环境表面消毒效果的监测

2.1采样时间:在消毒处理后4h内进行采样。消毒后的采样一定要采用中和剂，不同消毒剂所用中和剂则不同。

2.2采样面积及采样方法:用5cm×5cm的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，采样面积≥100cm2，连续采样4个，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检，送检时间不得超过6h。门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样。

2.3检测方法

(1)细菌总数检测:将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打80次，用无菌吸管吸取1.0ml待检样品接种于灭菌平皿，每一样本接种2个平皿，内加入已溶化的45℃～48℃的营养琼脂15ml～18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置36℃±1℃温箱培养48h，计数菌落数。

采样结果计算方法：

平板上菌落数×稀释倍数

细菌总数(cfu/cm2)＝────────────────＝菌落数×0.10

采样面积(cm2)

小型物体表面的结果计算，用cfu/件表示。

2.4结果判定

Ⅰ、Ⅱ类区域：细菌总数≤5cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。

Ⅲ类区域细菌：总数≤10cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。

Ⅳ类区域细菌：总数≤15cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。

母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的物体表面不得检出沙门菌。

三、医护人员手及皮肤黏膜采样及检查方法

3.1采样时间：在接触患者、进行诊疗活动前采样。

3.2采样方法

(1)手的采样:被检者五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液浸湿的棉拭子在双手指曲面从指根到指端往返涂擦2次，一只手涂擦面积约30cm2，涂擦过程中同时转动棉拭子；将棉拭子接触操作者的部分剪去，投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，及时送检。

(2)皮肤粘膜采样:用5cm×5cm的标准灭菌规格板，放在被检皮肤处，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转动棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液的试管内，立即送检。不规则的粘膜皮肤处可用棉拭子直接涂擦采样。

3.3细菌菌落总数检查

将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打80次，用无菌吸管吸取1.0ml待检样品接种于灭菌平皿，每一样本接种2个平皿，内加入已溶化的45℃～48℃的营养琼脂1