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蛋白质组学在脂肪来源干细胞治疗糖尿病创面中的研究进展2024(全文)

糖尿病足(diabeticfootulcer,DFU)是糖尿病最严重的和最常见的并

发症之一［1］。据估计，约15%的糖尿病患者经历过足部溃烂,全

球每20秒左右就会有糖尿病患者被截肢,其中超过一半的患者在5年内

死亡［2］。DFU严重威胁了患者的生命安全，并增加了患者及家属

的心理负担，因此急需更安全高效的治疗方法，促进创面愈合，避免患者

截肢。脂肪干胞(adiposederivedstemcells,ADSC)是目前常用的

糖尿病创面修复方法之一，能明显促进皮下组织血管微循环［3］0

对比常规治疗，自体ADSC移植联合常规治疗能很好地控制2型糖尿病

(type2diabetesmellitus,T2DM)患者血糖，并增强其胰腺B胞的

分泌功能［4］。Shen等［5］将ADSC播种到聚乳酸壳聚糖共

聚物支架上，移植到糖尿病小鼠背部创面，与单纯支架治疗相比，其愈合

率更高，伤口真皮厚度和胶原蛋白含量显著增加。证实以ADSC为种子

胞治疗糖尿病创面效果显著，明显地促进创面血管新生和真皮胶原合成。

目前学者通过蛋白质组学对糖尿病创面的发病机制及使用ADSC促进糖

尿病创面愈合及其机制进行了一些研究，现综述如下。

_、蛋白质组学及其研究方法

澳大利亚学者ilkins等于1994年首先提出了蛋白质组概念，其指一个

胞或一种生物所表达的全部蛋白质［6］。蛋白质组学本质上指的

是在大规模水平上研究蛋白质的特征，包括蛋白质在胞中随时间变化的

表达、翻译后的修饰以及蛋白之间的相互作用等，并能从蛋白质层面全面

综合地了解疾病发生发展的过程和机制［7］o其主要研究方法涉及

样本的提取纯化、蛋白分离鉴定和大数据处理分析。蛋白质组分离技术有

双向凝胶电泳技术、多维液相色谱技术、双相荧光差异凝胶电泳。鉴定技

术是以生物质谱技术为核心，常用的有基质辅助激光解吸-飞行时间质谱、

电喷雾质谱两种；定量分析技术包括同位素标记相对和绝对定量技术、

胞培养条件下稳定同位素标记技术和序列窗口采集离子谱质谱技术等。最

后利用蛋白质数据库和生物信息学方法来辅助获取并进一步分析信息。

二、蛋白质组学在糖尿病创面发病机制中的研究进展

L在炎症反应中的研究:2013年，Krisp等［8］利用液相色谱与串

联质谱联用质谱技术，调查和比较了慢性DFU患者和普通烧伤患者渗出

液中的蛋白组成差异。通过分析每个蛋白光谱数，揭示了188个在慢性创

面中差异表达的蛋白。大多数的蛋白涉及炎症反应、血管再生和胞凋亡

的生物学过程。炎症反应激活的S100蛋白(主要是S100A8和S100A9)

是高表达基质金属蛋白酶中基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinase,

MMP)1、MMP2和MMP8是高表达，其能促进胶原蛋白的降解和组织

的破坏;具有抗血管增生活性的蛋白也是高表达，血管数目减少，不能向

创面组织供应充足的营养，以致创面处胞死亡，创面处坏疽的发生也加

速了这种胞死亡［8］oRiaz等［9］利用单向电泳和双向凝胶

电泳的方法找到差异蛋白并平行进行质谱分析，结果发现与正常人相比，

糖尿病患者血清中C反应蛋白增加872%。所以，Riaz等［9］认为

糖尿病患者c反应蛋白增加与糖尿病炎症的发生有关。在临床试验中，应

用无标记定量质谱法对健康体检者、T2DM患者和DFU患者的血清进行

检测分析结果显示T2DM组和DFU组血清组织蛋白酶S(cathepsinS,

CTSS)水平明显升高，而DFU组CTSS表达水平又显著高于T2DM组

(P0.001)［10］。CTSS是脂肪组织的生物标志物，脂肪组织能

够产生各类炎性因子，其在血液中的浓度会随着肥胖而逐渐上升，使机体

处于低度炎症状态［11］o而较高循环水平的CTSS与炎症活动的增

加有关，并参与葡萄糖和胰岛素代谢的早期失调［12］o在糖尿病创

面中，巨噬胞比较易极化成Ml形式，从而释放大量的促炎因子。糖尿

病炎症环境并非在出现创面后才形成,研究发现创面形成前，糖尿病小鼠

的炎症标志物如诱导型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase,