紫外可见分光光度法 (10).ppt

物质的吸收光谱与测定条件有密切的关系。测定条件（温度、溶剂极性、pH等）不同，吸收光谱的形状、吸收峰的位置、吸收强度等都可能发生变化。*第四节紫外可见分光光度法的条件选择第63页,共83页，5月，星期六，2024年，5月1086420204060800.70.40.20.1AT%Er(36.8)0.434浓度测量的相对误差与T(或A)的关系实际工作中，应控制T在10～70％,A在0.15～1.0之间(调c,b,?)一、试样浓度的选择：最佳值最佳读数范围第64页,共83页，5月，星期六，2024年，5月第65页,共83页，5月，星期六，2024年，5月二、入射光的波长的选择“吸收最大?max，干扰最小”A?X?maxY(2)第66页,共83页，5月，星期六，2024年，5月三、显色条件的选择1.显色剂的选择1.灵敏度高，选择性好。（一对一）Cu~NH3e620=1.2×102Cu~双硫腙e533=5.0×1042.显色产物组成恒定,性质稳定。3.显色产物与显色剂色差大,显色时颜色变化明显.试剂空白值小。4.显色条件要易于控制，以保证其有较好的在线性。第67页,共83页，5月，星期六，2024年，5月2.显色剂的用量（由实验确定）M+R=MR(被测组分)(显色剂)(有色化合物)R过量,反应完全,MR稳定,A值稳定.AAACRCRCRabab000A与CR关系图选择曲线变化平坦处。显色剂用量过量、适量、定量。第68页,共83页，5月，星期六，2024年，5月3显色温度、时间适宜的显色时间和温度由实验确定（曲线平坦部分对应的时间和温度就是测定吸光度的最适宜时间）At25℃50℃t/minA第69页,共83页，5月，星期六，2024年，5月四、酸度的选择OH-酸度的影响副反应M+nR=MRnH+存在型体的变化RH=R-+H+生成不同配比的络合物例，磺基水杨酸(ssal)–Fe3+pH=2~3FeR紫红色pH=4~7FeR2橙色pH=8~10FeR3黄色pH12Fe(OH)3沉淀第70页,共83页，5月，星期六，2024年，5月pH1pHpH2选择曲线中吸光度较大且恒定的平坦区ApH第71页,共83页，5月，星期六，2024年，5月五.干扰离子的影响及其消除方法A、控制溶液酸度B、加入掩蔽剂C、利用氧化还原反应，改变干扰离子的价态D、利用校正系数E、利用参比溶液F、选择适当的波长G、增加显色剂用量H、采用适当的分离方法，分离干扰离子第72页,共83页，5月，星期六，2024年，5月E.参比溶液(空白溶液)在测定时用空白溶液调节仪器A=0(T=100%),以消除溶液中其它物质的干扰,抵消比色皿对光反射、吸收.1)溶剂参比试液、试剂、显色剂均无色(无吸收)则可用溶剂如纯水作参比溶液.第73页,共83页，5月，星期六，2024年，5月2)试剂参比试液无色,显色剂或其它试剂有色(有吸收),则应选试剂空白.3)试液参比试剂、显色剂均无色(无吸收),试液中其它组分有色,则应采用不加显色剂的试液作参比溶液.选择参比溶液的总原则是:使试液的吸光度能真正反映待测组分的浓度.第74页,共83页，5月，星期六，2024年，5月*例1．取咖啡酸，在165℃干燥至恒重，精密称取10.00mg，加少量乙醇溶解，转移至200mL容量瓶中，加水至刻度线，取此溶液5.00mL，置于50mL容量瓶中，加6mol/L的HCL4mL，加水至刻度线。取此溶液于1cm比色池中，在323nm处测定吸光度为0.463，已知该波长处的，求咖啡酸百分含量。解：第75页,共83页，5月，星期六，2024年，5月1、双光束分光光度计与单光束分光光度计相比，其突出优点是()(1)可以扩大波长的应用范围(2)可以采用快速响应的检测系统