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药物分析-浅谈HPLC法测定有关物质时已知杂质的计算方法

根据药品注册的国际技术要求(ICH)中杂质的含义，杂质分为有机杂质、无机杂质和残留溶

剂。有关物质是杂质的一种，主要是指有机杂质。它的检查方法很多，而其中的HPLC法具

有专属性强、分离效果好、灵敏度高、分析速度快、重复性好、操作简便等诸多优点，且能

与多种类型检测器联合应用，能满足大多数化合物种类的检测需要，比较符合有关物质检

查时杂质含量低、种类多的特点。

HPLC法测定有关物质中已知杂质的测定方法很多，计算方法也相应很多，每种计算方法都

有不同的意义及其优缺点，下面参考国内外药品标准和相关期刊文献，结合在药品检验中

的实际工作，对这些计算方法作一简单探讨，以期为药品质量标准的建立或进行相关研究

时对有关物质检查中已知杂质的计算方法的选择提供借鉴和参考。表1是各种计算方法的计

算公式及其主要优缺点。

表1各种计算方法的计算公式及其主要优缺点

No计算方法计算公式(杂质含量%)优点缺点

1面积归一化法AyA.×10%精密度好操作简捷无需杂质需较宽的线性范围/

对照品响应因子不同带来误差

操作简便运算方便无需杂质响应因子不同带来误差

2.1不加校正因子的主成分自身对(A×C?)/(A×CJ)×1006

照法对照品

2.2杂质不容易定位

加校正因子的主成分自身对照(A×C)/A?×C,×F)×结果较准确无需杂质对照品

法100

×C,)/(AxC,×100%

不加校正因子的主成分对照品结果较准确无需杂质对照品需主成分对照品响应因子不

3.1

外标法同带来误差

加校正因子的主成分对照品外(A,×C)/(A,×C,×F×结果准确无需杂质对照品

3.2需主成分对照品杂质不容易

标法1AC)A×C3×1006结果准确定位

4杂质对照品外标法需杂质对照品

5加转换因子的杂质对照品外标((A×C,×Z)/(A,×C)×结果准确需杂质对照品

法100

6加转换因子和校正因子的主成需主成分对照品杂质不容易

(A×C×Z)/(A,xC×B×结果准确无需杂质对照品

分对照品外标法100%定位运算复杂

7内标法[(A,×O/(AxC)I×[(A可抵消仪器和过程带来的误差

需内标物质和对照品操作和

×Co/(A.×Co)×100%运算较繁瑛

注，A,供试品溶液中杂质的峰面积A。除溶剂峰以外的总色谱峰面积A对照溶液中主峰面机A主成分对照品溶液中主峰面积A,杂质

对照品溶液中主峰面积C.对照溶液浓度，C供试品溶液浓度，C.主成分对照品溶液浓度，C杂质对照品溶液浓度，A.C与A.C.分别指

内标法中对照品溶液和供试品溶液中内标物质的峰面积和浓度，A与C分别指内标法中对照品溶液的峰面积和浓度，F校正因子，即各已知杂

质相当于主成分响应的换算系数，Z转换因子，即主成分与杂质的分子量之比.

1面积归一化法

优缺点：

具有与称样量及进样量基本不相关的特点，因此重复性和重现性均良好，不需