稻瘟菌糖蛋白激发子结合蛋白的定位及质谱鉴定的开题报告 .pdfVIP

稻瘟菌糖蛋白激发子结合蛋白的定位及质谱鉴定的开题报

告

1.研究背景和意义

稻瘟病是水稻上的一种重要病害，可以造成极大的经济损失。目前已知，稻瘟菌

糖蛋白激发子结合蛋白（SRA）与稻瘟病毒核衣壳蛋白VPg复合物有着紧密的结合关

系，并在病毒复制中发挥重要作用。因此，确定SRA的定位和质谱鉴定是深入研究稻

瘟病的分子机制，寻找抗病机理和对策的关键步骤。

2.研究内容和方法

本实验的研究内容是确定SRA在水稻体内的定位及质谱鉴定。研究方法包括以

下步骤：

（1）克隆SRA基因的cDNA序列，并构建表达载体。

（2）将表达载体转化至大肠杆菌BL21（DE3）中，表达和纯化SRA蛋白。

（3）制备抗SRA的多克隆抗体，并进行Westernblot验证。

（4）将SRA蛋白标记荧光物质，观察其在水稻细胞中的定位。

（5）利用质谱鉴定技术，对SRA蛋白进行分析，确定其氨基酸序列和分子量等

信息。

3.预期结果和意义

通过对SRA的定位和质谱鉴定，预期可以获得以下结果：

（1）确定SRA在水稻细胞中的定位，揭示其作用机制。

（2）通过质谱鉴定技术，确定SRA的氨基酸序列、分子量等信息。

（3）为深入研究稻瘟病的分子机制提供理论依据。

（4）为寻找抗病机理和对策提供重要信息。

4.进度安排

本实验的进度安排如下：

第一周：克隆SRA基因的cDNA序列，并构建表达载体。

第二周：将表达载体转化至大肠杆菌BL21（DE3）中，表达和纯化SRA蛋白。

第三周：制备抗SRA的多克隆抗体，并进行Westernblot验证。

第四周：将SRA蛋白标记荧光物质，观察其在水稻细胞中的定位。

第五周：利用质谱鉴定技术，对SRA蛋白进行分析，确定其氨基酸序列和分子

量等信息。

第六周：数据分析和撰写实验报告。